マウスのパイエル板を摘出してその細胞をHBSSを用いて調整しようと思っています。
細胞調整する際はすべてのものを滅菌して用いるということで、HBSSを120℃、20分間オートクレーブにかけました。すると、加熱前のHBSSは無色透明だったものが加熱後は茶色く変色してしまいました。
HBSSにはグルコースが入っているのでそれが原因だと思うのですが・・・。変色してしまったものは細胞調整に使用できるのでしょうか?
ちなみに
HBSSは
KCl、KH2PO4、NACl、Na2HPO4、NaHC03、D-グルコースを超純水で調整し、HClでpHを7.4にあわせてからオートクレーブしました。
何かご存じの方がいらっしゃったら教えてください。よろしくお願いします。
A 回答 (2件)
- 最新から表示
- 回答順に表示
No.2
- 回答日時:
グルコースがカラメル化するには温度が低いようですし、アミノ酸やペプチドは入っていないので、メイラード反応というわけでもなさそうですが。
変色の理由はともかく、私なら大事な実験には使わないでしょう。
最近では、この手の培地や塩溶液は調製済みの市販品を使うことが多くて、自前で作ることがあまりなくなってきているので忘れがちですが、
複数の塩からなる塩溶液は溶かす順番があったり(そうしないと難溶性の塩が生じて溶けなくなる)、加熱する(オートクレーブをかける)ときに一緒にしてはいけない組み合わせがあるので、すべての試薬を一気に終濃度で混ぜてはいけないものが少なくないです。
HBSSの場合は、4液に分けて、それぞれ滅菌してから混ぜるみたいですね。
http://cellbank.nibio.go.jp/sheet/att00011.htm
No.1
- 回答日時:
細胞培養については専門家ではありませんが、確か細胞培養のための
培地は、オートクレーブ滅菌できない成分が多かったような気がします。
その場合は、0.2μm以下のフィルターでろ過滅菌する必要があると
思います。
いずれにしても、粉末培地のメーカーが指定している方法や、培地調製の
教科書などで書かれている滅菌方法を確認されるのが良いと思います。
お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!
似たような質問が見つかりました
- その他(ニュース・時事問題) ようやくこのような話が… 2 2022/12/09 22:21
- 生物学 【生命科学】ヒトが1日に消費するATP量?(精度を変えて再計算) 3 2022/10/07 18:48
- 不妊 胚盤胞移植後の体調について 1 2022/08/24 16:03
- 化学 化学の純度の計算を教えてください 大至急!! 純水約120 mLに3mol/L硫酸2 mLを加えた溶 1 2022/06/09 01:02
- 化学 化学の純度の計算を教えてください 純水約120 mLに3mol/L硫酸2 mLを加えた溶液を調整し、 1 2022/06/06 01:31
- 呼吸器・消化器・循環器の病気 どの整腸剤が合うのか 1 2022/09/23 15:49
- スピーカー・コンポ・ステレオ レコードの針圧調整について。 細かいことになりますが、質問させてくださいませ。 当方のレコードプレー 2 2022/08/11 20:40
- 医学 活動電位について 1 2022/10/14 13:12
- モニター・ディスプレイ ASUS ノートパソコン有機EL AMDディスプレイ 白 1 2023/07/22 13:36
- 生物学 細胞死について 細胞内の組織の分解が、その同じ組織の構築と修復と同様に能動的な生体現象であるのなら、 1 2023/04/01 20:03
おすすめ情報
デイリーランキングこのカテゴリの人気デイリーQ&Aランキング
マンスリーランキングこのカテゴリの人気マンスリーQ&Aランキング
おすすめ情報