No.2ベストアンサー
- 回答日時:
まず、SDS電気泳動(多くの場合はSDS-PAGE, SDS-polyacrylamide gel electrophoresisと言います)をやる目的ですが、タンパク質をサイズの違いで分離する方法です。
例えば、細胞の中にはかなりの種類のタンパク質があるため、何かの方法で分離して検出する必要があります。SDS-PAGEでは、この分離を「タンパク質のサイズ(タンパク質の長さ)の違い」で行います。SDS-PAGEの原理ですが、
1.タンパク質をSDSで変性させる(タンパク質の立体構造が壊れる)
2.電気泳動でタンパク質をポリアクリルアミドゲルの「網目」を通過させる(大きいサイズほど流れにくく、小さいサイズのタンパク質は流れやすい)
というものです。網目を通過しやすいかしにくいかでタンパク質の長さを測定します。結果として、ゲルの下の方には小さいタンパク質が、上の方には大きいタンパク質がきます。
SDSで変性させる理由ですが、タンパク質を直鎖状にすることです。タンパク質はその機能を発揮するために特有の立体構造(疎水結合やジスルフィド結合などを利用して)を形成します。タンパク質をそのまま泳動すると、ポリアクリルアミドゲルの「網目の通りやすさ」はタンパク質の長さだけに影響されず、タンパク質の形状(立体構造)にも影響を受けます。
SDS-PAGEを行う場合の多くは、タンパク質の長さだけを知りたいので、タンパク質の立体構造に影響される電気泳動は望ましくありません。そこで、SDSでタンパク質を直鎖状にして電気泳動します。
では、SDSをいれるとなぜ、タンパク質が直鎖状になるか、です。SDSは親水基と疎水基の両方をもつ化合物です。そして、その親水基は負(マイナス)に荷電しています。
タンパク質の立体構造はアミノ酸残基(アラニン、グリシン、リジン、トリプトファン・・・)の性質(特にアミノ酸残基がもつ電荷)の影響を大きく受けます。SDSがタンパク質に作用すると、SDSの疎水基側がタンパク質に親水基側が溶媒側に結合します。このタンパク質に結合したSDSの親水基(マイナスに荷電)がタンパク質を構成する様々なアミノ酸の特性を打ち消してしまいます。結果として、SDSが結合したタンパク質はアミノ酸残基の影響をうけられなくなり直鎖状になります。
また、このようにSDSが結合したタンパク質はマイナスに荷電しますので、電気泳動をするとタンパク質(とSDSの複合体)はマイナスからプラスの方へ泳動されていきます。
最後に、立体構造に大きな影響を与えるジスルフィド結合に関してです。このジスルフィド結合はSDSによって壊されません。そこで、多くのSDS-PAGEを行う場合は、SDSと共に2-mercaptoethanolやDTTといったジスルフィド結合を壊す還元剤で処理したタンパク質を電気泳動します。
なお、立体構造も含めて解析したい場合は、Native PAGEと呼ばれる方法で電気泳動を行います。
No.1
- 回答日時:
検索すると結構いろいろ出てくると思うのですが、参考URLにもあるように、たんぱく質を変性させて、その大きさ(重量)によって、含有タンパク質を分離する方法です。
参考URL:http://www.gelifesciences.co.jp/technologies/ecl …
お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!
似たような質問が見つかりました
- 環境学・エコロジー 酢酸エチルと酢酸エチルエステル 3 2022/05/25 15:05
- 水泳 「趣味の水泳の際」、「ゲイだからと言って、薄々のビキニ」で泳ぐのは、変態ですか? 2 2022/04/18 21:00
- 水泳 水泳の後、腹痛になります。 自分は中学生でこの時期水泳の授業があるのですが、水泳の後、毎回お腹が痛く 2 2022/07/06 15:22
- その他(スポーツ) 50代からのフィットネス 筋トレ主体でやるべきでしょうか? 1 2022/08/31 18:20
- 物理学 無励磁作動型電磁ブレーキの作動について 4 2022/05/18 11:18
- docomo(ドコモ) 詳しい方アドバイスお願いします。 現在、ドコモ使用です。使用はLINEやメール、ゲームや動画を見たり 2 2022/07/30 13:38
- 生物学 シャトルベクターの大腸菌への形質転換 1 2022/07/02 23:19
- 水泳 成人クラスに通おうと思っている水泳初心者です! 1 2023/07/11 21:50
- 電車・路線・地下鉄 【電気機関車に詳しい電車オタクまたは電車マニアの方に質問です】電気機関車というED車 2 2023/06/08 20:00
- 電気工事士 高圧電力の電気料金の案分方法 1 2022/08/10 07:20
おすすめ情報
デイリーランキングこのカテゴリの人気デイリーQ&Aランキング
-
電子レンジでタンパク質が毒に...
-
糖分制限すると
-
精液について
-
私が炒め物、味噌汁を作ったの...
-
Mature peptide
-
濡れない布 最近買ったスウェッ...
-
卵白アルブミン=オボアルブミ...
-
DNAの抽出実験のトリプシンにつ...
-
電気泳動前のサンプル処理での...
-
タンパク質の凝固
-
大腸菌からのHisタグタンパク質...
-
吸光度比
-
電気泳動 CBB染色 脱色液方法...
-
SDS-PAGE
-
ゼブラフィッシュmRNA強制発現
-
遺伝子の読み方について
-
GST結合タンパク質が精製できま...
-
RNA抽出について
-
たんぱく質の吸光係数(紫外線...
-
SDS電気泳動について教えて下さ...
マンスリーランキングこのカテゴリの人気マンスリーQ&Aランキング
-
精液について
-
電子レンジでタンパク質が毒に...
-
遺伝子の分野で「コード」って...
-
卵白アルブミン=オボアルブミ...
-
タンパク質の凝固
-
酵素 分子活性Kcatの算出方法
-
電気泳動 SDSの熱処理について
-
食器のタンパク質汚れは水のほ...
-
BSAとゼラチンの違い
-
150KDa~200KDaの範囲のたんぱ...
-
同じタンパク質なのに分子量が...
-
たんぱく質の吸光係数(紫外線...
-
タンパク質をボルテックスできるか
-
mRNAレベルとタンパク質レベル...
-
「カルノア液」について教えて...
-
タンパク質ってボルテックスし...
-
電気泳動前のサンプル処理での...
-
CTAB法におけるクロロホルム/...
-
SDS-PAGEで濃縮ゲルがタンパク...
-
血の付いた
おすすめ情報