HPLCでヒポキサンチンとイノシン酸を分けたい

HPLCでヒポキサンチンとイノシン酸を分けたいのですが、うまくいきません。shodexのＨＰを見るとマルチモードのカラムを使っているようですが、何しろ高いので買えません。現在カチオン交換カラムを使ってやっていますが、はっきりわかれません。１本のピークだったり、肩に少し、山が出たりという感じです。移動相、ｐＨ、カラム、温度等、アドバイスよろしくお願いします。ちなみにODSカラムも所有しています。

No.3 ベストアンサー 回答者： kako3111 回答日時： 2001/08/02 17:46

AcCNはアセトニトリルの略のつもりです。

すみません。
それと移動相はアイソクラティック（単一溶媒）で流しています。
移動相の作製方法はKH2PO4（２０．４ｇ）をHPLC用蒸留水（５L)に溶解し、
この水溶液にアセトニトリル（HPLC用）（５０．５ｍｌ）を添加し、減圧濾
過します。別個にメンブランフィルターでろ過しておくことを薦めます。

カラムの種類は逆相のものなら大抵は分析できます。個人的には野村化学、
資生堂、YMC製のものが耐久性に優れているようで愛用しています。

この回答へのお礼

ありがとうございます。
さっそくやってみたところ、きれいに分かれて、
感激いたしました。
本当にありがとうございます。

お礼日時：2001/08/06 10:13

No.2 回答者： kako3111 回答日時： 2001/08/02 16:20

逆相系カラムで以前行ったことがあります。

カラム：COSMOCIL　５C１８ーAR4.4Φ×150mm（ナカライ製）
移動相：30mM　KH２PO４／AcCN（９９／１）
検出：UV２５４nm
速度：1.0ml／min
温度：30℃

リテンションタイム
IMP：2.8min
HxR：8.5min
Hx：3.6min

今使用されている条件との比較はできませんが、定量性はあります。
ただし、私どもでの使用条件では１００時間くらいで劣化が見られま
した。

この回答へのお礼

ありがとうございます。
初歩的な質問で恐縮ですが、「AcCN」ってなんですか？
KH２PO４と、「AcCN」のグラジエントってことですか？
移動相について、もう少し詳しく教えて頂けると助かります。

お礼日時：2001/08/02 17:09

No.1 回答者： hebikera 回答日時： 2001/07/11 20:56

ヒポキサンチンやイノシン酸の分析をしたことはありませんが・・・

移動相のA液とB液のグラデーションをもっと緩やかにしてみると言うのはだめでしょうか。それが一番安価だと思いますが。