はじめまして。
現在、卒業研究したての学部3年生です。
細胞実験を行っておりますがカウンテスで細胞数を測定しようとすると細胞が明らかに少なくなってしまいます。培養は上手くいっており、実験前の観察でも細胞は多くあります。アドバイス、改善点ありますでしょうか?以下、簡単な手順です。
培養液をアスピレーターで吸う
10mlのPBSで洗浄
アスピレーターで吸う
1mlトリプシンで細胞をはがす
3~5分インキュベート
9mlの培地を振りかける
15mlチューブに移す
1000rpm 3分で遠心
ペレットを吸わないようアスピレーターで吸う
10ml培地を加えて30回ほどピペッティング
10.5mlの細胞懸濁液、トリパンブルーを混ぜて、カウンテスプレートに入れる
測ると細胞が少ないです(´;ω;`)
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