No.4ベストアンサー
- 回答日時:
>合成に失敗することってあるんですか?
以前、某cDNA合成会社に発注を掛けたところ、PCRがぜんぜんかからず、1ヶ月ほど色々試してやっと配列が読めたと思ったら、primerの配列がめちゃくちゃに間違っていたということがありました。
その会社に発注したprimerは、その後もうまくPCRがかからず、primerの配列がおかしい、ということが続いたので、二度と使用していません。
それくらい、間違いもあるんですよ。
この回答への補足
シグマはどうなんですか?
配列は自分で指定すると思うんですが、
そのとき間違えたんじゃないですか?
それともメーカーの合成機がエラーを吐いたのですか?
メーカーもちゃんと目的の物ができたかどうかを
シークエンスで確認するんですか?
No.7
- 回答日時:
>どこのメーカーですか?
>もうつぶれてしまっていそうですが。
どこのメーカーか言えませんが(さすがに書き込めません)、今でもprimerをガンガン作ってますよ。
未だにそのメーカーを信じている人も少なくないです。
No.6
- 回答日時:
合成機でのDNA合成効率は、一塩基につき90%くらいだそうです。
合成長が長くなればなるほど、それより短い副産物の割合が大きくなります。メーカーによっては、正しい合成長が十分に含まれているかを、MASS、HPLC、PAGEなどでチェックして合格したものを納品してくれます。通常のPCRではそこまでやることはあまりないですが、不完全長の副産物を完全に除く必要がある場合は、脱塩カラムだけでは無理で、HPLCやPAGEによるオプションの精製が必要になってきます。
合成は簡単に言うと、合成カラムにくっつけたままで、一塩基付加、基質の洗い流し、脱保護(次の塩基が付加できるようにする)を繰り返します。100 %確実に反応が進むわけではないので、多かれ少なかれ、配列が正しくないものが含まれてきます。機器や試薬の管理状況によってはさらに品質が悪化する可能性はあります。しかし、配列をチェックするサービスはないと思います。技術的にもコスト的にも難しいと思います。
No.5
- 回答日時:
シグマはきちんと大きさチェックしてくれますね。
なので、今はシグマかinvitrogenです。
>配列は自分で指定すると思うんですが、
>そのとき間違えたんじゃないですか?
3人の目を通して配列間違いがないかを確認していますので、人為的な間違いはありません。それほど素人でもありませんし。
No.2
- 回答日時:
DNAシンセサイザーは結構高いですよ。
少なくとも15年前までは。結構ランニングコストもかかります。普通に作る分には製品を買った方が安いかと思います。うちなんかはほぼ毎日稼動してましたけど、導入の理由は、その当時は合成請負業者が少なく、納期がすごくかかったため、持っていただけで、コスト的には度外視していたと思います。また、大量に使うことはわかっていたので、業者側からすれば、モニターテストってことで製品自体値引きしていたかもしれません。
でも合成機の値段なんか調べればわかりそうなものですから、そういうものの導入に責任のある方なら、ここで聞くより、コスト計算をちゃんとした方が、よいと思うのですが。
No.1
- 回答日時:
その通りです。
DNAシンセサイザ(合成機)という機械を用いて合成しています。研究室規模でも購入できます。
http://www.appliedbiosystems.co.jp/website/jp/pr …
参考URL:http://www.appliedbiosystems.co.jp/website/jp/pr …
この回答への補足
機械はどのくらいするんですか?
1塩基65円くらいするみたいですけど。
頻繁に注文するなら合成機を買った方が安上がり
かもしれないですね。
合成に失敗することってあるんですか?
お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!
似たような質問が見つかりました
- その他(ホビー) 塗装のやり方について 3 2023/04/03 07:19
- 美術・アート ピアノに絵の具を塗るために。 3 2022/06/25 16:26
- リフォーム・リノベーション 自作FRPバスタブ(露天風呂)の補修 2 2023/04/15 13:53
- その他(教育・科学・学問) 機械工学科の志望理由です。至急です。面接でいう文章ですがこれで良いのでしょうか。指定校推薦です。著し 5 2022/11/18 22:26
- その他(悩み相談・人生相談) これを明日の面接で言おうと思ってるんですけど大丈夫ですかね 私が機械工学科を志望する理由はものを製作 1 2022/11/19 19:44
- 統計学 確率について 会社ではある製品を生産しており、生産機会が3種類ある。製品はどれか一つの機会で作る。機 2 2022/05/30 18:33
- シューズ・ブーツ コンバースのソールが真っ白なので、使い始める前にゴムのソールを貼ろうと思っています。 ボンドを塗る前 1 2022/12/13 23:33
- 工学 機械工学科を志望する理由です 添削をお願いします 私が機械工学科を志望する理由はものを製作することに 1 2022/11/19 09:43
- 英語 会社で英語を使うことになっての英語の勉強方法 5 2022/07/03 11:49
- コスメ・化粧品 顔がゴワゴワなってきました。夏用のファンデーションやプライマーによるものでしょうか。職業柄、マスクと 2 2023/08/05 10:56
おすすめ情報
デイリーランキングこのカテゴリの人気デイリーQ&Aランキング
-
DNA塩基配列から推定されるアミ...
-
DNA
-
遺伝子の塩基配列の問題がわか...
-
Blastにおける用語
-
突然変異(転座・逆位・欠失・...
-
2つのシークエンスによる結果の...
-
HBVの「マイナス鎖」と「プラス...
-
PCRプライマーへの制限酵素配列...
-
DNAプローブの作り方
-
アミノ酸配列からの逆翻訳プロ...
-
PCRの 5’・3’ が分からず困っ...
-
遺伝子操作
-
プライマーのこと
-
フィボナッチ数列と生物
-
ヒトのGC含有率はいくらですか?
-
RAPD法とAFLP法について
-
Primer3のLeftとRightの方向
-
Poly(IC)とは
-
mRNAの塩基配列にチミンが入る...
-
アミノ酸配列の比較
マンスリーランキングこのカテゴリの人気マンスリーQ&Aランキング
-
cos末端とは何ですか?DNAの端...
-
系統樹の読み方について
-
2つのシークエンスによる結果の...
-
DNA断片のシークエンス結果の読...
-
Poly(IC)とは
-
DNA
-
遺伝子操作
-
Primer3のLeftとRightの方向
-
DNA塩基配列から推定されるアミ...
-
DNAとRNAのどのような性質に違...
-
poly-Aとは
-
アリル特異的PCR法の原理を教え...
-
生化学に関して
-
一本鎖核酸のモル吸光係数の算出
-
卒論で遺伝子配列とアミノ酸配...
-
HBVの「マイナス鎖」と「プラス...
-
cDNA産物は1本鎖ですか?
-
Blastにおける用語
-
Shine-Dalgarno...
-
PCRの 5’・3’ が分からず困っ...
おすすめ情報