形質転換の実験で・・・

形質転換の実験でコンピテントセルとプラスミドを
混合しプラスミドを大腸菌に導入後、アンピシリンを含まない
培地で37度で1時間ほど培養するという操作はなぜ必要なのですか？
その間に何が起きているのでしょうか？
わかる人いたら教えてください。

No.1 ベストアンサー 回答者： noname#4684 回答日時： 2002/06/20 10:30

その１時間の間に起きていることは、

１．　大腸菌の健康状態の回復
２．　アンピシリン耐性遺伝子の発現

です。


コンピテントセルは薬剤処理で細菌細胞膜が、かなり弱ったぼろぼろの状態になっています。これゆえにプラスミドが容易に中に入れます。この状態から１時間培養することで、大腸菌を回復させます。
また、導入した遺伝子は直後すぐに発現するわけでもないでしょうから、１時間ぐらいみれば安全かな（そろそろ発現して Amp 耐性になっている）という事です。

ヒートショック直後にまいても、大丈夫ではあるみたいです。しかし、あらっぽいやり方なので、得られるコロニー数は少ないようです。

この回答へのお礼

回答ありがとうございます。
納得いきました。
大腸菌の健康状態の回復なんてそこまで考えが
及びませんでした。
とても参考になりました。

お礼日時：2002/06/21 00:11