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二次元電気泳動のサンプルでSDS-PAGE、Western Blottingをやりたいのですが、二次元電気泳動のサンプルには尿素がふくまれているため、煮沸をすると駄目になってしまいます。
何かいい方法はありませんか?

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A 回答 (2件)

煮沸しないでもSDS化できますよ。



サンプルバッファーを加えて常温で半日とか、37℃で1時間でいけます。
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この回答へのお礼

御回答ありがとうございます。
煮沸しなくてもSDS化出来るのですね!
とても勉強になりました。
教えていただいた方法で再度やってみようと思います。

お礼日時:2007/07/19 11:08

>二次元電気泳動のサンプルでSDS-PAGE、Western Blottingをやりたい



2Dのスポットを切り出して、
抽出したサンプルをもう一回電気泳動するのですか?
それとも二次元目のゲルからメンブレンにトランスファーしてWBするのですか?
それとも2D用に調整したサンプルを、SDS-PAGEで流したいのですか?

とりあえず、尿素をのぞきたいのでしたら、限外ろ過で除けます。
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この回答へのお礼

ご回答ありがとうございます。
2D用に調製したサンプルをSDS-PAGEでながしたいのです。
回答していただいた通り、限外ろ過を検討してみたいと思います。

お礼日時:2007/07/18 12:24

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