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- 回答日時:
よくあることです。
カラムから酸などで蛋白を溶出していると思いますが、これはつまり抗体や蛋白を一時的に変性させて結合力をなくしているわけです。バッファーを中性に戻せば変性が元に戻る事も多いですが、次第に変性したまま元に戻らないものが増えてきて結合力が落ちるのもよく見かけます。これは溶出ー中和の条件にもよるでしょうし、個々の抗体の性質にもよるでしょう。
変性によって溶出するのではなく、エピトープ部分のペプチドを用いて競合的に溶出すれば、へたりは少ない事が期待できます。
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