レジオネラの検査をする時,一般にBCYE-α培地等を使って培養しますが,この時,アメーバ等に取りこまれているレジオネラも培養していることになるのでしょうか?また,前処理の段階でこれら取りこまれているレジオネラは,バッファ中に放出されるのでしょうか?仕事上大変困っています。どなたか助けて下さい。

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A 回答 (1件)

うーん。

考えたことなかったですね。
強酸処理の段階で、アメーバは死んでしまうと思うのですが、中に生息しているレジオネラはどうなんでしょう?
宿主(この表現が正しいかどうかはわかりませんが)が死んでしまったら、レジオネラも死んでしまうのではないか・・・と思うのですが。

すいません。全然!回答になってませんね・・・。
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この回答へのお礼

こんなトウトツな質問に答えていただいて有難うございます。
聞きたかった内容はまさにこのことで,レジオネラの殺菌には塩素(次亜塩素酸Na)を用いることが多いと思いますが,もしかすると,この塩素消毒が完全でない場,合検査結果でかえってレジオネラが多く検出されることになるのではないかと心配しているところです。
もし,また些細なことでも気づいた点がありましたらよろしくお願いします。

お礼日時:2001/03/18 23:25

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Q液体培地で培養すると大腸菌が生えてこないんです。

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この問題を解決する方法がございましたら、お教えください。
よろしくお願いします。

Aベストアンサー

初心者、を前提に回答させていただきます。

まずは以下の点を、再確認してみてください。
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→Ampは結構不安定なので、AmpRで選抜するならCb(50ug/ml)を使ったほうがいいかもしれません。またTOPOならKmRもあったとおもうので、Cb, Km両方入れてはいかがでしょう?プレートに入れたAmpが死んでいて、プラスミドを持たないのに生えてきたコロニーを拾ったのかもしれません。

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Q大腸菌培養の液体培地

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長期保存の場合は、filtlationして、冷蔵保存です。

Q寒天・砂糖・タバコ培地を使った、微生物の培養について

実験で、微生物の培養を行いました。

それぞれの培地の成分は以下の通りです。

【寒天培地】
  酵母エキス
  ペプトン
  寒天
  蒸留水

他の培地は、上記のものに、砂糖・タバコ(タバコの抽出液)をそれぞれ加えて作成し、外に10分間放置ました。

結果、寒天培地とタバコには、カビとバクテリアの両方が見られ、砂糖には、カビだけが見られました。

●そこで、タバコのどの様な成分が、微生物にとって、必要な成分だったのでしょうか?
【人間に有害なものでも、微生物には必要な成分があるのでしょうか?】

●砂糖培地に、(砂糖培地を3個作り、その三個とも)カビだけしか培養できなかったのは、何か砂糖に原因があるのでしょうか?【バクテリアには必要ない成分なのでしょうか?】

それと、寒天培地を使って、池の水での培養を行い、(これを6種類作りました)3個は、普通に培養し、後の3個は、紫外線を数分間照射しました。

●紫外線には、殺菌効果があるはずですが、結果は、バクテリアだけ殺菌されず、見られました。
そこで、紫外線では死なないバクテリアは存在するのでしょうか?
【この実験で、バクテリアが見られたのは、紫外線の照射が足らなかったものだと考えていますが、考察要素として書き加えたいので・・。】

参考になるような本が中々ないので、上記の1つでも分かる方がいらっしゃいましたら、回答のほうをよろしくお願いいたします。

実験で、微生物の培養を行いました。

それぞれの培地の成分は以下の通りです。

【寒天培地】
  酵母エキス
  ペプトン
  寒天
  蒸留水

他の培地は、上記のものに、砂糖・タバコ(タバコの抽出液)をそれぞれ加えて作成し、外に10分間放置ました。

結果、寒天培地とタバコには、カビとバクテリアの両方が見られ、砂糖には、カビだけが見られました。

●そこで、タバコのどの様な成分が、微生物にとって、必要な成分だったのでしょうか?
【人間に有害なものでも、微生物には必要な成...続きを読む

Aベストアンサー

別に考察については他の資料も"足して"行うのは問題ないと思いますが、
自分の実験から何が言えるかについて書かないと、
実験レポートではなくてただのレポートになってしまいます。

外に10分間置くという操作ではすべてのシャーレに同じように、
カビやバクテリアが落ちてきたのかわからないと思います。
これだと砂糖を入れたシャーレにバクテリアが生えてこないのが
たまたま落ちてこなかったのか、
砂糖によって増殖が抑制されたのかわかりません。

●そこで、タバコのどの様な成分が~
寒天培地とタバコ入り培地の両方でバクテリアの増殖が見られたので、
バクテリアの増殖を阻害する物質が阻害する濃度で含まれていないことがわかります。
増えたバクテリアのコロニーの大きさや特徴から、
増殖に与える影響や影響を受ける菌の種類について考察できるかもしれません。

今回の実験ではないようですが、
タバコ無し培地で増殖しないで、
タバコ入り培地で増殖する条件が存在するのならば、
タバコ中にバクテリアの増殖に必要な成分があると考えられます。

また、その物質を同定してから人間への影響を調べる
(または人間に有害な物質を同定してからバクテリアへの影響を調べる)ことにより
【】内について調べることができます。

●砂糖培地に~
濃度の問題を忘れていませんか。
その濃度ではバクテリアの増殖が抑制されている(または死んでいる)ということはいえると思いますが、
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また、高濃度の砂糖を含むガムシロップに
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表面にカビが生えたという話は聞いたことがあります。

●紫外線には~
”池の水での培養”の操作がわかりません。
また、通常の培地は高圧蒸気滅菌して作りますが、
池の水がいつ、どのような状態で使われたのかがわかりません。
紫外線は赤外線などの長い波長のものよりかは弱いですが、
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また、紫外線を照射したものとしていないものとの比較がよくわかりませんが、
バクテリアだけ殺菌されずと書いてあるということは
紫外線-→バクテリア+カビ
紫外線+→バクテリアのみ
ということでしょうかそれならばカビの増殖抑制に紫外線が効果があったことと、
今回の条件ではバクテリアへの影響が見られなかったことがわかります。
また、これについてもできたコロニーから、紫外線の影響のあるバクテリアの種類について考察できると思います。

紫外線で死なない菌がいると本に書いている大学教授がいますが、
引用すると質問者さんの書いているレポートすべてが
「非科学的」であると考えられてしまう恐れがありますので
引用しないほうがいいと思います。

別に考察については他の資料も"足して"行うのは問題ないと思いますが、
自分の実験から何が言えるかについて書かないと、
実験レポートではなくてただのレポートになってしまいます。

外に10分間置くという操作ではすべてのシャーレに同じように、
カビやバクテリアが落ちてきたのかわからないと思います。
これだと砂糖を入れたシャーレにバクテリアが生えてこないのが
たまたま落ちてこなかったのか、
砂糖によって増殖が抑制されたのかわかりません。

●そこで、タバコのどの様な成分が~
寒天培地...続きを読む

Q寒天培地上で培養した細菌の細胞濃度の計算

先日、寒天培地で納豆菌を10^6倍に希釈したものと10^8倍に希釈したものを培養しました。
シャーレに注いだ液量はそれぞれ0.3mlです。

一週間培養を続けたところ、10^6倍ではシャーレ全体に広がった細菌が確認できました。
一方、10^8倍のほうでは直径1mm程度の小さな点が端に一つ観察されただけでした。

ここから細胞濃度を計算しなければならないのですが、計算式すら分かりません。
どうも平板塗抹法というらしいのですが、探し方が悪いのか検索しても見つからず困っています。

どなたか教えていただけないでしょうか?
よろしくお願いします。

Aベストアンサー

「希釈平板法」で探しましょう。

コロニーの大きさは関係なく、単にコロニーの数に 希釈率を掛け合わせます。

統計的な確率が関係しますから、コロニーが一つだけだったりした場合には、
やり直さなければならないかもしれません。

ところで、「10^6倍ではシャーレ全体に広がった細菌が確認できました」というのは、
コロニーが一つと言うことですか? それともとても多いという意味ですか?


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