人の末梢血からB細胞を集めてEBウイルスでの不死化を計画しています。 それほど厳密にB細胞だけを選択したいのではなく、「B細胞リッチ」になればそれでいいのですが、簡単な方法をご存じでしたらおおしえください。

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A 回答 (2件)

rei00さんもお書きの新生化学実験講座に出ている方法が最も簡便だと思います.他にゼラチンを使って方法があり試薬調製の点で簡便,低コスト,かつ不死化細胞の回収率も高いですが,操作に時間がかかることと若干のテクニックを要します.また,最近では「磁石」を使った方法があるようですがこちらの方はわかりません.



我々のところでは,上記成書に記載のFicoll-Conray混液を調製する変わりに,武藤化学薬品が出している「リンパ球分離液セパレート-L」を使っています.滅菌調製済なので楽です.

成功のポイントは「採血後の時間を短く」と「静かに重層」です.(前者はこの方法に限りませんが)
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お書きの内容はあなたの研究の一部ですね。



それでしたら,何故,文献検索をなさらないのでしょうか。PubMed で「B cell」,「human」,「blood」,「separation」等,ご質問文中に出てくる用語を検索するだけで,いくつかそれらしいタイトルの文献がヒットしますが。

あるいは「生化学実験講座」の類の成書は御覧になりましたか。何らかの記述はあるような気がしますか。

それとも,文献検索は済ましたが見付からないという事でしょうか(そんな事はないと思いますが)。それでしたらお許し下さい。
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T細胞は、抗原提示細胞がMHC上に提示した抗原をTCRで認識します。
つまり、ウイルスのペプチドなど、他の細胞の内部で作られた抗原を認識します。
MHC分子が、細胞内にできた抗原ペプチドを結合して細胞表面に提示されたときに、認識が行われます。
T細胞は、MHC分子ー抗原ペプチド複合体の固有の構造を認識するのにTCRを用います。

B細胞は、抗原分子に存在する抗原決定基(エピトープ)を直接BCRで認識します。



説明が下手でごめんなさい。

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T細胞の抗原認識の登場人物は、
・T細胞
・抗原提示細胞
・抗原
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T細胞は、抗原提示細胞がMHCに載せた抗原を確認します。

B細胞の抗原認識の登場人物は、
・B細胞
・抗原
です。
抗原が体内に入ってくると、
B細胞はそのまま抗原を見つけることができます。


ちなみに、B細胞は抗原を見つけると、
・その抗原に対する抗体を作る   だけではなくて、
・抗原提示をする(つまり、T細胞などに抗原があったよ~と知らせる)
役目もやっています。

T細胞は、抗原提示細胞がMHC上に提示した抗原をTCRで認識します。
つまり、ウイルスのペプチドなど、他の細胞の内部で作られた抗原を認識します。
MHC分子が、細胞内にできた抗原ペプチドを結合して細胞表面に提示されたときに、認識が行われます。
T細胞は、MHC分子ー抗原ペプチド複合体の固有の構造を認識するのにTCRを用います。

B細胞は、抗原分子に存在する抗原決定基(エピトープ)を直接BCRで認識します。



説明が下手でごめんなさい。

もっとくだいてみると…

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