HindIII

の検索結果 (25件 1〜 20 件を表示)

λDNA/HindIII断片の電気泳動

…λDNAをHindIIIで消化後、アガロースゲル電気泳動にかけ、HtBrで染色後、トランスイルミネーターで現像しました(露光時間は2秒)。 理論的には以下の8つの断片ができるので、バンドも8つでき...…

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segment と fragment

…The HindIII-BamHI segment in plasmid pHT014(AIII) was replaced by the HindIII-BamHI fragment prepared from pHT114mut with the desired deletion, giving plasmid pHT016 (A21II). segmentとfragmentの違いが判りません。 fragmentはプラスミド...…

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制限酵素のバッファーについて

…制限酵素でPCRしたDNA配列をinsertとしてvectorに入れようとおもっています。 その際に2種類の制限酵素で切断しようと思っています。組み合わせはSapIとHindIII、SalIとHindIIIです。 これらで同時...…

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バンドの濃さから求めるDNAの量

…λDNA(0.31μg/μl)を制限酵素HindIIIで切断し泳動しました。 「その泳動結果の写真のバンドの色の濃さから そのバンドにはどれくらいのDNA量があるか」 ということが求められるらしいのですが...…

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組み込む理由が判りません。

…プラスミド・pHT114mutの段階でABCの能力を持ち、 大腸菌に組み込んで、取り出して pHT014に組み込んでpHT016になると ACの能力しか発現しないという流れだと思います。 大腸菌に入れて、出す...…

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プラスミドプロファイル

…E.coliを関崎の変法にてプラスミド抽出を行い、その後0.7%ゲルにて電気泳動を行いました。 マーカーにはタカラのλ-HindIIIを用いています(環状のプラスミドを流した場合のマーカーがわからな...…

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三成分のライゲーションについて

…PCRで増幅した2種類のインサートを、直列に繋いでベクターに導入しようとしています。 下のようになります。 EcoRI EcoRI HindIII HindIII EcoRI EcoRI ----| |--------| |---------| |----- ベクター イン...…

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オリゴマーのアニーリング

…ベクターの構築をやっているものですが・・・ 80〜90bpのオリゴマー(sense, anti-sense)を購入し、これらをアニーリングして(プライマーダイマー形成風に) ベクターへ導入しようと思っています...…

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DNAアガロースの電気泳動

…研究室に配属されたばかりの3年生なんですが、ショウジョウバエの幼虫からDNAを抽出し、PCRを用いてそれを増幅させ、電気泳動で、DNAが増幅されているかどうかを確認する実験をしました。...…

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アガロースゲル電気泳動で

…ちわっす! 答え魔ぽんたくんでっす♪ 今日は困ったコトがあって、投稿しました。 DNAマーカー(λ/HindIII)を1%アガロースゲルで電気泳動してるんだけど、DNAが高分子の部分でスメア状のバン...…

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制限酵素に関する実験

…先日、制限酵素の実験をやって今レポートを書いているんですが、discussionの部分に何を書いたらいいのかわかりません。 実験の内容はλDNAを制限酵素XhoIとHindIIIを使って切って制限地図を作...…

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プラスミドの制限酵素切断

…いつもお世話になっております。 TAクローニングからプラスミドを抽出し、制限酵素処理をおこなって発現ベクターへのインサートを調整する系の実験を行っております。 コロニーのダイ...…

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制限酵素によるプラスミドの切断

…生物学の実験で、制限酵素によるプラスミドの切断の実験を行いました。 制限酵素で二重鎖DNAを切断し、生じたDNA断片をアガロースゲル電気泳動により分離するという方法です。 コントロ...…

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酵素処理(ダブルダイジェスト)

…いつもお世話になっております。 ダブルダイジェストでの制限酵素処理について教えて下さい。 現在、発現ベクターへのクローニングを、PCRproductを制限酵素処理→ベクターへ導入のプラ...…

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遺伝子クローンニング

…酵素X(分子量:42000)を生産する微生物を分離した。酵素Xをコードする遺伝子xをクローニングするために以下のような操作を行った。 PCRにより遺伝子xの一部の増幅を試みたところ、約700bpのPCR...…

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制限酵素で有名なものは?

…制限酵素でよく知られているもの、使われているモノにNotIやEcoRIなどがあると思いますが、このほかに有名なものや使用されているものはなんですか?…

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サザンブロットの結果について

…論文を読んでいて、どうしてもわからなかったのでお聞きしたいです。 同じサンプルを同じ制限酵素(Xba(1))で処理しているのに、サザン解析の結果では様々な位置にバンドが検出されている...…

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PCR断片をインサートとするクローニング

…以前にも何度かこちらで質問させていただいているのですが、PCR断片に制限酵素サイトをくっつけたものをインサートとしてクローニングを行おうとしているのですが、プライマー設計の際...…

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Ligation high

…かなり前にまりますが(十年くらいかも) Ligation highというLigation kitを使用していたのですが その当時 発売されたもので、画期的だったのですが (室温で5分でライゲーションができるという...…

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制限酵素地図の作製について

…初質問です。 よろしくお願いします。 プラスミドDNAを5種類の制限酵素で切断し、電気泳動させて、制限酵素地図を作ろうと思ったのですが、 計算してもDNAサイズの合計が全然違います。 ...…

解決

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