Hisタグ

の検索結果 (47件 1〜 20 件を表示)

Hisタグつきでタンパク質を結晶化したのですが

Hisタグつきでタンパク質を結晶化しました。 構造解析した結果Hisタグの部分がヘリックスになっていたんですが、これは普通のことなんですか? Hisタグが見えたのは初めてなので教えていた...…

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hisタグについて

…hisタグとはいったいどういうものなのか教えてください。 よろしくお願いします…

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Hisタグを用いたタンパク精製

…もし、分かる方がおりましたらアドバイスよろしくお願いいたします。 私は、枯草菌の研究をしています。 ある遺伝子の働きが「ラセマーゼ」ではないかということをin vivoの実験におい...…

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大腸菌からのHisタグタンパク質精製

…大腸菌からHisタグ付タンパク質(100kDa)を精製しているのですが、発現はたくさんしているのですが、His精製すると、フロースルーにたくさん落ちてしまい、一部しか精製できません。 フロー...…

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his タグ

…クローニングにおけるhis タグの発現のさせ方がわかりません。 cDNAを作成する際に目的タンパク質とヒスチジンをコードするmRNAを使うのですか? さっぱりわかりません。 また、PCR法を用...…

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Hisタグをつけたタンパクの精製および濃縮について

…もしわかる方がいらっしゃいましたらご教示ください。 私はII型膜蛋白(C末端にHis-Mycタグ有)を動物細胞にて発現させ、Niカラムで精製後、Amicon(MILLIPORE製)を使用して蛋白のBuffer置換および濃...…

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タンパク質の保存期間

Hisタグつきタンパク質をNiキレートカラムで精製し、 イミダゾールで溶出したのですが、 そのまま4℃で保存する場合、イミダゾール溶液中ではタンパクはどれくらいの期間安定に保存でき...…

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PCRの失敗について

…PCR後電気泳動したんですが、 バンドが出てきません。 PCRって失敗することあるんですか? 単にプライマーとテンプレートを入れ間違えたんでしょうか? テンプレートの前後にPCRによりタグ...…

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遺伝子の機能解析

…質問させていただきます。 私は、現在枯草菌のあるオペロンのひとつの遺伝子の機能解析を行っています。 その遺伝子は、ラセマーゼではないかと示唆させているのですが、あと一歩とい...…

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免疫組織染色.抗体タグは種類によって何が違う?

…生物学初心者です. 抗体タグについていくつかわからないことがあります. アドバイスをいただけると幸いです. 免疫組織染色に使用する抗体タグには, 6xHis,HA,c-Myc,FLAG,GFP などを代表して,約...…

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タンパク質実験

…これからタンパク質実験系を起こそうと考えているのですが、まず何をすればよいかわかりません。 完全長cDNAはあります。 まず、そのcDNAがコードするタンパク(protein kinase)の活性を調べた...…

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His融合蛋白の精製

…関連トピをいくつか読み試してみましたが改善されませんでしたので新しく質問させていただきます。 1kbほどの遺伝子をpET32ベクターに組み込み、His融合蛋白として発現させました。 可溶...…

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タンパク質と安定性

…タンパク質の精製を行っています。 精製についてはどの本を見ても「タンパク質によって精製法が違う」というのは分かったのですが、考慮すべき点のなかで(塩) 安定性についてどのように...…

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タンパクの発現に関して

…あるタンパクの発現を試みているのですがまったく発現しません。 意見をいただけると幸いです。 よろしくお願いします。 以下条件です。 使用ベクター:Qiagen pQE30 発現させるタンパクの...…

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1st メチオニンのコドン

…mRNAから蛋白ができる際に1st メチオニンはATG(AUG)のみでコードされてると思っていたのですが、例外的にCUGでコードされることもあるのですか?あるとすれば、この蛋白の発現ベクターを組む...…

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タンパク質の変性と巻き戻しについて

…大腸菌を用いて15k程度のタンパク質を発現させてるんですが、ほとんど不溶画分にいってしまい、現在は変性剤等を用いて可溶化を試みています(低温培養、アルギニンの導入はダメでした) ...…

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形質転換について

…アグロを用いて植物の形質転換を行おうと思っています。 植物体に存在する遺伝子を導入し過剰発現、もしくはアンチセンスにより発現抑制を行って、その遺伝子の機能を見ることを目的と...…

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GST融合タンパク

…現在、目的のたんぱく質をGST融合タンパクとして大腸菌内で発現させ、アフィニティーカラムを用いて精製を行っています。 上清には十分量でてきているのですがカラムを通してもほとんど...…

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HIS MISS のブランドについて。

…こんばんは。 先日、HIS MISSのコートをオークションで購入しました^^ とってもかわいくて気に入っているのですが、HIS MISSの HPを見たところ、閉店?したというのです。 けっこうお姉さん系...…

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可溶性画分と不溶性画分について

…タンパク実験の初心者です。 タンパク実験でリコンビナントタンパクを精製する際、なぜ可溶性画分だと精製しやすくて、不溶性画分だと精製しにくのですか?? またインクルージョンボディ...…

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