電気泳動のDNAバンドが出ないです

電気泳動のバンドが出ずに困っています。
現在マウスの肝臓組織からDNAの抽出→PCR→電気泳動によるバンドを見る実験を行っています。
ポジコンは電気泳動もPCRも出るので、DNA抽出の際に原因があると考えています。
DNA抽出のプロトコルは

①界面活性剤（DNA ZOL）を注入しホモジナイズ
②10000xg10分遠心後水層を分離（DNA層の分離）
③水層200μlに対し100μlの100％ethanol（エタ沈）
④5000xg10分遠心後ethanolを捨てる
⑤75％ethanolを注入し（リンス）
⑥5000xg10分遠心
⑦もう一度ethanolを捨て注入し5000xg10分遠心
⑧ethanolを捨て水に溶かす。


試してみたのは
・サンプル量を減らしてみる（②での不純物を減らす）
・遠心のｇを増やし、収量をあげる
・すべて氷上で行う。

③の段階で白いものが出てくるのでDNAは出てるのではないかなと思っています…。
サンプル量が多いと黄色いものも混じっています（脂質？）
②で不純物が混入するとPCRって出ないものですかね？（わずかでもDNAがあればPCRで増幅されると思うのです…。）
あと、たまにバンドが出るときがあるので余計にわからないです…。
写真は両端がﾎﾟｼﾞです

No.1 ベストアンサー 回答者： doc_somday 回答日時： 2018/10/29 19:34

＞サンプル量を減らして

逆でしょう。
＞ｇを増やし
濃度勾配がついていないと不純物は増える。
＞氷上で
意味不明。
＞混入
バンドが増える。
＞脂質
脂質はあってもなにもしない。

この回答へのお礼

解答ありがとうございます！
脂質なにもしないのですね。サンプル増やして試してみます！

お礼日時：2018/10/31 10:25

No.2 回答者： larme001 回答日時： 2018/10/30 09:52

ポジコンと何の？

単にDNAがしっかり解けてないだけではないかと。

この回答へのお礼

もう一度よくとかして試してみます。ありがとうございます！

お礼日時：2018/10/31 10:23