No.3ベストアンサー
- 回答日時:
マニュアルにあると思いますが、遠心する目的はチューブの底部にsampleを集めるためです。
通常の制限酵素処理のような酵素処理とは異なり、PCRでは高温で反応させるため、sample内で熱対流が十分に起こります。そのため、事前によく混和しなくても、遠心で底部に集めておけば十分です。Realtime PCRは現在ほとんどが、ABIかRocheですが、ABIであれば上記のような理由になります。Rocheですと、#2の方のおっしゃるようなことですね。Realtime PCRではミネラルオイルは使用せず、また気泡もよほどひどくなければ熱をかけたさいに除かれます。
No.2
- 回答日時:
私が行っているリアルタイムPCRでは、template とそれ以外の反応液を別々にアプライするため、これらをmixし、キャピラリー内に入れるために遠心しています。
参考になりますでしょうか。No.1
- 回答日時:
(1)ミネラルオイルをしっかりかぶせて、サンプルの蒸発を防止する。
(2)サンプルの中に残っている気泡を追い出す。
(3)サンプルをチューブの底部に集中させる。
という目的があるのではないでしょうか。
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