A 回答 (1件)
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No.1
- 回答日時:
私も細胞毒性をチェックする場合、MTT assayを利用しております。
対照波長の件ですが、必ずしも測定する必要はありません。
MTT assayの場合、対照波長を600~630nmに合わせるのが一般的ですが、その範囲の波長において試薬の吸収がない事を表しています。
試料の濁り等の非特異的吸収を確認することができます。
濁りは測定値に影響を与えますので、対照波長から全体的な濁りを確認し、測定値から差し引いて下さい。
試料によってはほとんど濁りの無いものや、多少の濁りは気にしない場合もあるかと思いますので、実験系にあわせて測定して下さい。
それからブランクの件ですが、
私は細胞+培地を対照波長で測定し、細胞自体の濁りなどを確認しています。
またそれ以外のブランクとしては、
培地+試薬を測定波長で測定し、培地と試薬の誤発色がないかを確認する方法があります。
ご自身の実験系に合わせて使い分けてみて下さい。
この回答へのお礼
お礼日時:2005/09/30 09:18
大変わかりやすいご回答ありがとうございました。たすかりました。このメールを参考に1度測定いたします。ありがとうございましたm(__)m
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