DNA複製について

生物が行うDNA複製とPCR法ってどこがちがうんですか？

No.1 回答者： fujishiro 回答日時： 2003/01/18 15:08

生物ではDNA鎖はあくまでも二本鎖である事が前提です。

このため、リーディング鎖とラギング鎖ができますね。

PCRでは熱で二本鎖をほどいて一本鎖にしてます。
反対方向に読むプライマーをつけることによって両方向をリーディングとすることができます。

この回答へのお礼

ありがとうございました！

お礼日時：2003/01/19 11:23

No.2 回答者： japonicus 回答日時： 2003/01/18 20:35

生物が行うDNA複製では、酵素が２重らせんをほどいて１本鎖にし、そこに別の酵素の働きでプライマーという短いDNA断片が作られて、そのプライマーを起点にしてDNA合成酵素が新しい２重らせんを作って行きます。

最初にほどかれた２重らせんの１本ずつそれぞれに新しい２重らせんが作られてゆき、最終的に新しい２重らせんが２つ出来上がります。

PCRでは、DNAに高熱をかけることで２重らせんをほどいてやります。あらかじめ試験管の中にプライマーをたくさん入れておき、そのプライマーがほどけたDNA鎖にくっつくことで、そこを起点にDNA合成酵素が新しい２重らせんを作って行きます。

生物が行うDNA複製が全DNAをコピーするのに対し、PCRでは複製したいDNA領域の上流と下流にくっつくようなプライマーを使うことで、目的の領域だけを大量に複製することができます。現在では、自由自在に好きなプライマーを人工的に作ることができます。

酵素等の蛋白質は熱に非常に弱いのですが、PCRを使ってDNA２重鎖をほどくためには90℃以上の熱をかける必要があります。この熱に耐えられるDNA合成酵素が温泉細菌から発見されたことで、初めてPCRという手法が可能になりました。

ちなみに、複製したい領域だけを切り出して大腸菌などに組み込み、大腸菌を培養してやる方法でも、目的とする領域を大量にコピーするという観点ではPCRと変わりません。

この回答へのお礼

ありがとうございました！

お礼日時：2003/01/19 00:32