No.1ベストアンサー
- 回答日時:
ウエスタンの発色の一般論を述べたいと思います。
通常、HRPやAPなどの酵素で基質が変化すると、
その基質がメンブレン上に「沈着」していきます。
クロルナフトールを酸化クロルナフトールという物質については、申し訳ありませんが詳しくないですが、
典型的なものは、アルカリフォスファターゼとNBTの関係です。
https://www.nacalai.co.jp/toriatukai/pdf/330-332 …
二次抗体に結合というより、メンブレン上に沈着するということだと思います。
それで、発色中はメンブレンを「静止」させて置くことが重要で、
動かすとシグナルがぼやけたりする原因です。
この回答への補足
御回答ありがとうございます。
膜状に沈着する、ということですが、ただ単に沈着するだけなら、膜全体が発色してしまうということにはならないのでしょうか??
目的タンパクのみが発色するということは、変化した基質が、二次抗体を目印にして沈着しているとしか考えにくいと思うのですが・・・
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