No.2ベストアンサー
- 回答日時:
ちょっととらえ方をまちがえていると思います.
直鎖化するのは,ゲノムに組み込むためです.環状・直鎖が遺伝子導入効率に大きな影響を与えることはないと思いますよ.
SV40T遺伝子がすでに導入されたセルライン(COS7や293T)にsv40-oriを含んだプラスミドをトランスフェクションすると,導入した細胞内でプラスミドは増幅できます.だからタンパク質を高発現できます.
このとき,環状ではなく直鎖化しておくとそれがおこりません.この状態でG418などの薬剤でセレクションすると,生存できる細胞は必然的にゲノムにプラスミドがインテグレートした細胞のみになるはずです.
と,ここまで書いて思ったのですが環状のほうが質問者様の意図にあうと思います.トランスフェクションの効率はあまり差がないですが,環状だとその後増幅しますから,遺伝子導入効率が高いのと同じですよね.
この回答へのお礼
お礼日時:2003/07/24 01:09
お礼が遅くなってしまい申し訳ありませんでした。
そうですね。ゲノムに組み込むのが目的でなければ直鎖化する必要はないのですね。
とても参考になりました。ありがとうございます。
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