植物細胞のプロテアーゼ抽出法

プロトコールを見ると細胞の遠心、PBS(-)の処理、遠心分離をおこなった後、上澄を除いた細胞をKPMに懸濁して凍結させて保存とかいてあります。
しかし、私たちの使用できるサンプルはすでに液体窒素で凍結させた葉なので、凍結前の処理ができません。この処理はどうしても必要でほかの代用となる処理はないのでしょうか。また、凍結させた細胞から酵素を抽出する方法を知っている方は、教えていただきたいのですが。

No.1 回答者： kexe 回答日時： 2004/10/21 00:00

以前植物の葉から遺伝子や蛋白質、酵素を抽出したことがあるものです

ただプロテアーゼを抽出したことがないので
もし難点か教えていただければアドバイスできるかもしれません
まずKPMとはいかなるものでしょう？
その後保存したサンプルはどのように処理するんでしょう？
あと葉とはどのような植物の葉なんでしょう？
種がいえない場合には硬い葉ですか？柔らかい葉ですか？
また新芽ですか？完全に成長した葉ですか？

ただプロトコルを見た感じ、遊離した状態の細胞を洗い、
酵素の安定化液あるいは細胞の保護液に入れて保存している
のではないかと思うので
あまり気にする必要はないと思うのですが