はじめまして
プラスミドの抽出でプラスミド分子数を増やすのに、タンパク質阻害物質であるクロラムフェニコール【抗生物質】を加えるそうですが、大腸菌の増殖の仕方を探す事が出来ず「何処の段階で阻害」しているのかが分かりません。リボゾームに結合しタンパク質を作れなくするのはわかります、ファージでいるなら殻をつくる時だろうかと思いますが(この場合DNAだけ増えてく…でもファージには入れてません)
ので推測
プラスミドと細胞壁は別々に出来最後に中に入る…なんか違いますねぇ…(ううっ)大腸菌の細胞壁はタンパク質だろうか…たどたどしい質問で申し訳ありませんTT
No.1ベストアンサー
- 回答日時:
すみません、通りすがりなので詳しくは判らないのですが。
大抵の場合、増殖させたいプラスミドに抗生物質耐性遺伝子が組み込まれています。そして、そのプラスミドにあわせた抗生物質を培養液に入れて培養します。
するとプラスミドを持った大腸菌は抗生物質耐性遺伝子から作り出される物質のために抗生物質が効きにくくなり増殖することができ、
プラスミドを持たない大腸菌は抗生物質の作用で死滅し、
最終的にはプラスミドを持った大腸菌のみが選択的に普通に増殖していくということでプラスミドを増やしていく原理だったはずです。
つまり、大腸菌1匹(?)の中でプラスミドがどんどん増えるのが主な増殖方法ではなく(そういうこともあるかもしれませんが私は知りません)、大腸菌群全体でプラスミドを持ったもののみを増やしてプラスミドを抽出する増殖法であるということで理解しています。
ファージについての知識が私は乏しいのですが、ファージはプラスミドを大腸菌に導入するときに利用することはあっても、増殖するときには関係なかったような気がします。
参考URL:http://www.mls.sci.hiroshima-u.ac.jp/smg/educati …
No.4
- 回答日時:
普通に培養した後、クロラムフェニコールを加えてさらに培養を続けると、
菌は分裂できず、菌体内でプラスミドだけが複製するので、
大腸菌の細胞あたりのプラスミド数が増え、回収率が上がります。
コピー数が少ない株を使うときはこの方法が良いようです。
どういうしくみで分裂が阻害されるのかまでは知りませんが…。
No.2
- 回答日時:
クロラムフェニコールに耐性を与える遺伝子をプラスミドが持っている場合環境にクロラムフェニコールが増えてくるとプラスミドの数が増えるような反応がおきるのではないでしょうか。
プラスミドが増えれば耐性遺伝子も増えて大腸菌の耐性も増すと考えられます。ほかにクロラムフェニコールが大腸菌の調子を狂わせてプラスミドの増殖を抑えられなくなるということも考えられるのではないでしょうか.お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!
おすすめ情報
- ・漫画をレンタルでお得に読める!
- ・人生のプチ美学を教えてください!!
- ・10秒目をつむったら…
- ・あなたの習慣について教えてください!!
- ・牛、豚、鶏、どれか一つ食べられなくなるとしたら?
- ・【大喜利】【投稿~9/18】 おとぎ話『桃太郎』の知られざるエピソード
- ・街中で見かけて「グッときた人」の思い出
- ・「一気に最後まで読んだ」本、教えて下さい!
- ・幼稚園時代「何組」でしたか?
- ・激凹みから立ち直る方法
- ・1つだけ過去を変えられるとしたら?
- ・【あるあるbot連動企画】あるあるbotに投稿したけど採用されなかったあるある募集
- ・【あるあるbot連動企画】フォロワー20万人のアカウントであなたのあるあるを披露してみませんか?
- ・映画のエンドロール観る派?観ない派?
- ・海外旅行から帰ってきたら、まず何を食べる?
- ・誕生日にもらった意外なもの
- ・天使と悪魔選手権
- ・ちょっと先の未来クイズ第2問
- ・【大喜利】【投稿~9/7】 ロボットの住む世界で流行ってる罰ゲームとは?
- ・推しミネラルウォーターはありますか?
- ・都道府県穴埋めゲーム
- ・この人頭いいなと思ったエピソード
- ・準・究極の選択
デイリーランキングこのカテゴリの人気デイリーQ&Aランキング
-
アンピシリン入り寒天培地の作成
-
【 生基 DNAの複製 】 問題 窒...
-
大腸菌のフリーズストック
-
大腸菌のグリセロールストック...
-
コロニー形成について
-
シングルコピープラスミド
-
アルカリ-SDS法について
-
ベクターとプラスミドと形質転換
-
大腸菌の乾燥について 大腸菌は...
-
夏場の水道水って飲んでも大丈夫?
-
生物基礎 DNAの長さの計算
-
大腸菌のコロニーについて
-
LBプレートの扱いについて
-
PCRについて
-
グルコース_アンモニウム塩培地...
-
寒天培地の保存期間について
-
大腸菌の世代時間
-
ライゲーション(ベクターの構築)
-
ルチンの加水分解(ケルセチンの...
-
親の血液型で生まれる子供の血...
マンスリーランキングこのカテゴリの人気マンスリーQ&Aランキング
-
夏場の水道水って飲んでも大丈夫?
-
大腸菌のグリセロールストック
-
大腸菌のフリーズストック
-
LBプレートの扱いについて
-
サテライトコロニー?について
-
アンピシリン入り寒天培地の作成
-
コロニーが現れない
-
エタ沈後のペレットを確実に溶...
-
大腸菌のグリセロールストック...
-
生物基礎 DNAの長さの計算
-
電気泳動でバンドが出ない理由...
-
プラスミドの保存
-
寒天培地の保存期間について
-
DNAの抽出でsolution I・II・II...
-
大腸菌ストックのグリセロール...
-
コロニーPCRについて
-
プラスミドの回収率が低いので...
-
大腸菌からのプラスミド回収時...
-
大腸菌の倍加時間について
-
抗生物質について
おすすめ情報