ヒストンについて

実習でヒストンのSDS－PAGEをやりました。すると、H1のバンドが２本出てました。
これはどういうことなんでしょうか？？？

No.2 ベストアンサー 回答者： yutaka007 回答日時： 2001/11/09 08:47

どういった基準でその２本のバンドをH1と同定したのでしょうか。

それによって、若干答えが異なってきますが、結果をそのまま解釈すると「H1は２つある」ことになります。もっと解釈すると「H1は２つ以上ある」ことになります。というのは、用いている分離法がSDS－PAGEだけですよね（その前に、恐らく極端なpH組成の溶液で抽出しているのではないかと推察しますが）。SDS-PAGEで１本のバンドに見えているものが、本当に１種類と言いきれるのでしょうか？本当は２、３種類のポリペプチドが重なっているのかも知れません。これを調べるには、SDS-PAGE以外の別の原理の分離法、例えば、等電点電気泳動、（逆相）カラム等で解析する必要があります。

教科書や辞典を調べれば分かるように、H1には幾つもの分子種が存在しています。また、それらが翻訳後の色々な修飾も受けます。ですから、様々な種類のH1が色々な組織、細胞で機能しているわけですね。

この回答への補足

今回の実習では、胸腺細胞をBuffer A(10mM Tris-HCl(pH7.8),3mM MgCl2,1mM EDTA)で核の単離を行い、核にH2SO4を加えてヒストンを抽出し、TCAで沈殿させました。それからHClを加えました。

H1と同定した基準は、分子量マーカーを加えてSDS-PAGEを行って判断しました。実習書にもこれがH1だといったような書き方をして２本のバンドを示してありました。

補足日時：2001/11/10 02:35

No.1 回答者： kexe 回答日時： 2001/11/09 01:32

私はヒストンを流した事がないのでよくはわからないのですが

こういうことじゃないかと思います

SDS-PAGEであればサンプルを作る時、還元剤いれませんでしたか？
いれたのであればその還元剤によってタンパクはどうなるでしょうか？
タンパクの高次構造を良く考えればわかると思います。

もし違った場合には
試薬それぞれの役目を考えていくと答えが出てくるのではないでしょうか