タンパク質の定量 Ｂｒａｄｆｏｒｄ法

タンパク質（ＢＳＡ）の濃度を0，20，40、60，80,100μｇ／mlに希釈して吸光度を測定しました。
それでグラフ用紙にプロットしていたら濃度が濃くなるにつれて吸光度は上昇しているのですが、曲線になってしまいました。

これは試薬の希釈ミスなのでしょうか？それとも試薬とBradoford試薬を撹拌した後放置しすぎたのでしょうか？どうか教えてください。

No.2 ベストアンサー 回答者： nopopon2 回答日時： 2005/02/04 09:39

タンパク定量について書かれています。

http://www.ktokai-u.ac.jp/~nougaku/Bio/araki/pro …
直線性を求めるのでしたら、pierce社のBCA測定が簡便でよいです。測定濃度レンジによりBCA、マイクロBCAキットがあります。マイクロBCAはよく使っていました。

マイクロBCA
http://www.technochemical.com/pierce/protein/ass …
0.5-20μg/mlの測定が可能

BCA測定
http://www.technochemical.com/pierce/protein/ass …
BSAの測定においては20－2,000 μg/mlの直線性があります。
上記URLに共存物質の影響などもしるされているので、ご参考ください。

この回答へのお礼

ありがとうございます。
理解するのにＵＲＬは参考になりました。
またわからなっかたらお願いします。

お礼日時：2005/02/05 21:15

No.1 回答者： doc_sunday 回答日時： 2005/02/04 04:27

>>Bradoford試薬

Bradford試薬(oが１つ少ない）^^
添付ＵＲＬの図のように、多くは「直線にならない」ようです。
また、東大の授業資料ＵＲＬ　http://www.biochem2.m.u-tokyo.ac.jp/web/contents …
のようにＢＳＡは「不適切な例」ではないかと疑っている先生も居られます。

参考URL：http://www.nacalai.co.jp/toriatukai/pdf/243-244. …

この回答へのお礼

自分でも探したんですけどなかなかよいものが見つからなかったので,参考になりました。
また分からなかったらお願いします。

お礼日時：2005/02/05 21:18