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No.2
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biotin修飾の方法がよくわからないのですが、もしbiotin修飾primerでPCRをかけたという意味ならば、代わりに5'末端がリン酸化されたDNA鎖を消化する"λエキソヌクレアーゼ”を用いるのがいいかと思います。
目的配列の相補鎖側のprimerに5'末端がリン酸化されたもの用いてPCR
→λエキソヌクレアーゼで処理
すると、5'側がリン酸化された、つまり目的ではない鎖のみが消化され、目的の鎖のみが得られるはずです(正確には初めの鋳型は残りますが)
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