先日、質問させて頂いたのですが、自分がかなりの勘違いをしている事に気づき、またこちらに質問させて頂きます。
卵白アルブミンとヘモグロビンの混合溶液のゲルろ過を行い、SDSで流したのですが、そこで疑問に思うことがありました。
SDSの染色像を見ると、ゲルろ過を行いヘモグロビンとアルブミンの分離を行ったはずなのですが、ヘモグロビンとアルブミンの染色像が同じレーン上にでたのです。
最初は、こちらでの助言もあり、ヘモグロビンの変性が不十分で、ウェルに単量体と変性が不十分に行われなかったものが出て、アルブミンの方は濃度が薄くでてないのではかと思ったのですが、先生の方に質問しにいってみたところ、アルブミンとヘモグロビンが同じレーンにでて、何も出てないレーンには何もないと言われました。
卵白アルブミン分子量は約45000とヘモグロビンの分子量は約64000で、かなり違うと思うのですが、なぜ同じレーンにでたのでしょうか?
ゲルろ過がうまくいかなかったのでしょうか?
他のグループの染色像を見てみたのですが、同じようにでていたので、ゲルろ過がうまくいってないというのは考えにくいのですが。。
また、長々と質問させてもらい、すみません。
考察段階でとまってしまって困ってます。教えていただけるとうれしいです。よろしくお願いします。
A 回答 (3件)
- 最新から表示
- 回答順に表示
No.3
- 回答日時:
答えがわかったわけではありませんし、レポートということなので、わかったとしてもストレートに教えてあげることはできませんが、考察のヒントとして、、、、
1.バッファの条件が、吸着、分子間相互作用や溶出速度に影響を与えやすくなっていて、溶出速度が分子量を反映していなかった(実習に準備されたものに、そんな意地悪なことはしていないと思いますが)。
2.ゲルの分画範囲が、試料の分子量を下回っていて、void volume(排除体積)で、すっぽ抜けてきた。
文献でゲルろ過の原理を勉強して、いろいろ可能性を考察してみてください。
No.2
- 回答日時:
ゲル担体の種類によって、分離できる分子量は決まっています。
また、分子量に二倍の差がないと分離できない、と注意書きのある担体もありました。同じ担体で分子量の異なる複数のタンパク質を分離させ、どのような分離能を持つ担体か調べてみてはいかがでしょうか。参考URL:http://www.jp.amershambiosciences.com/tech_suppo …
お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!
似たような質問が見つかりました
- 病院・検査 質問です。 健康診断で今回貧血を指摘されました。27歳です。 ヘモグロビンが9.4でした。 私の母親 5 2023/06/17 11:10
- 糖尿病・高血圧・成人病 血糖値やヘモグロビンa1cは、どうしたら下がるのでしょうか? 5 2022/10/21 04:52
- 糖尿病・高血圧・成人病 44歳女性です。 約4年前に目の病気(視神経炎)の診断を受けて、ステロイドパルス治療うけました。 効 2 2023/02/10 06:39
- 病院・検査 そもそも貧血で入院→内視鏡で大腸がんステージ3から4→手術は難しい的な事を医師から言われ→退院して自 4 2023/02/26 00:08
- 病院・検査 4月から社会員で入社前の健康診断を受けるのですが、9000円ほど費用がかかるみたいです。検査内容とか 7 2023/03/07 19:32
- 血液・筋骨格の病気 献血。 今月5日(水)に献血に行きましたが事前検査でヘモグロビン濃度が基準値に達しなかったためできま 1 2023/04/21 23:38
- 病院・検査 献血に行きたいのですが、、 今月5日(水)に献血に行きましたが事前検査でヘモグロビン濃度が基準値に達 4 2023/04/23 21:13
- 婦人科の病気・生理 子宮摘出手術について 子宮内膜ポリープ1センチ数年前よりあり、 経過観察 チョコレート嚢胞7センチが 4 2022/12/14 12:55
- 血液・筋骨格の病気 母が貧血の疑いで血液検査した結果、 ヘモグロビンや白血球が少なくて大きな病院でもう一度血液検査をして 2 2022/12/02 20:45
- 呼吸器・消化器・循環器の病気 この血液検査、病状で肝硬変の可能性はありますか? 5 2023/04/29 22:31
おすすめ情報
デイリーランキングこのカテゴリの人気デイリーQ&Aランキング
-
SDS-PAGEの染色について
-
SDS-PAGEで分離したタンパク質...
-
ただしいデカントの方法
-
PD-10カラムを用いた抗体精製法
-
SDS-PAGE用マーカーが上手く流...
-
電子レンジでアガロースゲルが...
-
凍結乾燥の失敗について
-
SDS-PAGEのタンパク質固定について
-
酵素電気泳動法について
-
SDS-PAGE 移動度について
-
エチジウムブロマイドを触って...
-
ウェスタンとCBB染色のマーカー...
-
アガロース電気泳動を塩基対が...
-
希釈液の違いによる吸光度の違い
-
SDS-PAGEゲルのトラブル
-
SDS-PAGE
-
タンパクのサブユニット構造
-
Western blotting -バンドがす...
-
好中球を分離したい
-
キアゲンQIAquick Gel Extracti...
マンスリーランキングこのカテゴリの人気マンスリーQ&Aランキング
-
SDS-PAGEで、ゲルを作製すると...
-
ただしいデカントの方法
-
エチジウムブロマイドを触って...
-
凍結乾燥の失敗について
-
どうしてもエタノール沈殿が上...
-
可溶性画分と不溶性画分について
-
頭骨標本の脱脂用に使っている...
-
血清の採取方法
-
Native-PAGEをウェスタンに使う
-
精製方法の違いが分かりません
-
native-PAGE
-
ウェスタンとCBB染色のマーカー...
-
SDSサンプルバッファーを使...
-
電子レンジでアガロースゲルが...
-
「ドミナントネガティブ」
-
Western blotting -バンドがす...
-
アガロースゲル電気泳動の失敗
-
LC-ESI-MSとLC-MADLI-MSの違い...
-
coomassie blue染色とゲル乾燥
-
DNAの濃縮方法、分離&精製方法
おすすめ情報