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- 回答日時:
PAGEを終えたあとのゲルを直染めするとCBB、膜に転写するとウェスタンということですので、
目的タンパクのサイズが変わることはありません。
考えられることは、
1)マーカーサイズが微妙である。
同じマーカー例えば、ビオチン化スタンダードなどでCBBでもウェスタンでも使えるものでやってみる。
2)それでも、分子量が違うのであれば、素直に別のタンパクだったということでしょう。
タンパクが粗精製レベルで、大多数は20kDaの目的ではないタンパクなのですが、
特異的抗体で染めると目的のタンパクが可視化できるという。
CBBで見えるレベルのタンパク量はウェスタンには濃すぎます。
その辺のバンドの濃淡などの兼ね合いは問題ありませんか?
この回答へのお礼
お礼日時:2012/11/15 12:14
回答ありがとうございます。お礼が遅くなり申し訳ありません。
同じサンプルでやったのでCBBで見えたものとウェスタンで見えたものは違うものかもしれませんね。
ウェスタンがうまくできていないのかもしれないです。
一度二つのマーカーを使ってSDS-PAGEしてCBB染色したいと思います。
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