No.1ベストアンサー
- 回答日時:
もっと効果的な方法があるのかもしれませんが、私が思いつくのはこのような感じです。
RNAにpoly(A)を付加する酵素やキットが販売されていますので、それでpoly(A)tailを付けてから、oligo dTプライマーで逆転写→3'-RACEを行えばよいのではないでしょうか?
3'側のみの質問ですのでおそらくRACEについては説明不要と思い、割愛いたしますが、詳細はMolecular Cloning等の一般的な教科書に載っています。
この回答へのお礼
お礼日時:2007/04/04 22:25
ありがとうございます。
キットがあることを知らず、今調べてみました。
もしかして、cap構造も付加できるキットがあるのでしょうか。
知識がなく、末端の配列を知るにはどうしたらよいのか途方にくれていました。
No.2
- 回答日時:
capを付加するキットは聞いたことがありませんが、5'末端の配列は原理的には5'-RACEで全長解読可能なので、末端配列解析の目的では不要でしょうね。
RACEに関しても各社からキットが販売されており、メーカーによっていろいろと工夫があります。
カタログやメーカーホームページで一度詳細をご覧になるとよくわかるかもしれません。
検索すれば、参考URLのものを含め、色々なプロトコルが見つかると思います。
参考URL:http://www.natureasia.com/japan/naturemethods/po …
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