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No.2ベストアンサー
- 回答日時:
No1の回答は目的の表現型が分かっていて遺伝子が分からない場合(分かっていてもいいのですが)ですよね。
目的とする遺伝子の配列が分かっている場合はhomologous reconbinationという性質を利用します。double crossover homologous recombinationで検索すると、、、なかなかいいのが出てきませんね。確かにWeb上では見つかり難いですね。
http://www.jstage.jst.go.jp/article/jsv/54/2/54_ …
この論文ではBAC上の遺伝子を他のプラスミド由来の遺伝子と相同組換えさせていますが同じことがBAC上ではなくゲノムDNAで起きれば良いわけです。
大雑把に説明すると破壊したい遺伝子の大部分を抗生物質耐性の遺伝子で置き換えて、上流、下流には適当な長さのオリジナルの配列をインサートに持ったプラスミドを入れておけばある確立でゲノムDNAとの相同組換えが起こります。後はこのプラスミドが落ちるような仕組みがあると良いわけです。温度感受性だったり、もともと複製しないプラスミドだったり。
この程度の説明でリンク先が理解できれば検索の幅も広がりますよ。
この回答へのお礼
お礼日時:2008/12/10 10:47
お忙しい中ご丁寧に回答していただきありがとうございました。まだまだ初歩的段階ですが,頂いたアドバイスをもとに勉強させていただきます。
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