No.2
- 回答日時:
アガロース塩基泳動が適切におこなわれていて、690 bpと640 bpなら区別をつけることが出来る、という前提で、
まず第一に、シークエンス反応で鋳型の全長が読めるとは必ずしも限らないです。読み始め、読み終わりのノイズの高いところシグナルの低いところはカットされているかもしれません。
それと、両側鎖(両方向)それぞれシークエンスしてつきあわせた結果が640 bpだったのでしょうか。片側しか読んでいないのなら、原理的にプライマーより先の塩基からラダーが現れ、プライマー自体の配列はラダーに現れませんので、読める配列は鋳型の長さより短くなります(いわれなくてもわかっているよっ、てことだと思いますが)。
この回答への補足
回答ありがとうございます。
両側鎖付き合わせました、それで双方向のプライマー配列もあわせてカウントしたのですが、、、。
電気泳動関連の問題なのかもしれません。
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