カルシウムイオン濃度測定方法

細胞質における、カルシウムイオン濃度を実験的に測定する方法を教えて下さい。
よろしくお願い致します。

No.2 回答者： taka_yu 回答日時： 2008/08/25 11:56

前回答者の方が書かれているように、カルシウム指示色素を使う方法が一般的です。

Ca2+の濃度レンジや反応速度から適切な指示薬を選択します。おそらくもっとも使用されている色素がfura-2 AMです。5μMくらいにして30分ほどすれば細胞内に色素が取りこまれるので、そのあとwashoutします。

その他にCaMをCFPとYFPでつなげたカメレオンや発光タンパクのエクオリンも使いやすくなりました。

色素は世界的にはMolecular Probes（Invitrogen）のものが使われていますが、日本の同仁化学研究所でも買えます（せかくなので日本製を買いましょう）。

顕微鏡であれば、個々の細胞のCa2+動態を測定できます。浮遊細胞であれば、蛍光分光光度計も使えますし、蛍光が読めるプレートリーダーでもOKです。

参考URL：http://products.invitrogen.com/ivgn/en/US/adirec …

No.1 回答者： tomi-chan 回答日時： 2008/08/21 20:14

こんばんは。

細胞内カルシウムイオン濃度の動態を連続的に測定できる顕微鏡を使うのが良いと思います。これですと、カルシウムイオン濃度を可視化して測定できるだけでなく、カルシウムイオンの局在「状態」変化を動的に追って行くことができます。

参考URL：http://www.olympus.co.jp/jp/news/1998a/nr980320m …