No.2ベストアンサー
- 回答日時:
ふつう、PCRというのは検出するDNA断片の一つに対して、
一対のプライマーを設計しますよね。
ところがこの場合には増幅がプラトー(増幅限界を超えて、それ以上増えない状態)になった場合に、
定量が正確にできなくなってしまいます。ですから普通は、キャリブレーションを
とって、最適な増幅回数を決定してから本実験(定量実験)を行うわけです。
この場合はプライマーの余剰が問題になるわけです。
(と、この辺の話はおわかりでしょうか?)
一方、競合的PCRの場合は、目的とするDNA断片に加えて、”それと異なる配列を
持つけれども、同じプライマーで増える別のDNA断片(RT-PCRの場合は
内部標準となるDNA断片を加えることが多い)”を加えます。
もちろん、この別に加えるDNA断片はあらかじめ量が分かってるものです。
そうすると、2種類のDNA断片が、1種類のプライマーを奪い合う訳ですから、
増幅がプラトーに達してしまう前にプライマーが枯渇してPCRが終了します。
(この「奪い合う」状態が、「競合的」の語源になってます)
後から加えたDNA断片は、量が分かっているわけですから、それに対して
目的のDNA断片の増幅量を比較すれば、定量ができるという仕組みです。
競合的PCRは定量的PCRを行う方法のなかでも、
プライマーの余剰によるプラトー効果を防ぐ方法というわけです。
たぶん、これであってたはずです。家に帰ればちゃんとした資料が
置いてあるのですが…。現在会社なので(笑)
学生時代のつたない記憶を思い起こして回答してます。
#1の方の話は、
バイオ実験イラストレイテッド3+:細胞工学別冊
「新版 本当に増えるPCR」第8章
中山広樹著、(株)秀潤社発行 のことですよ。
競合的PCRの話は図がないとひじょーに説明しにくいので(笑)
いちど本屋さんをのぞいてみることをおすすめします。
ただし、医学部がある大学内の本屋か、紀伊国屋や旭屋、進々堂など、
専門書を扱っているかなり大きな書店でないと、置いてないですよ!
お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!
似たような質問が見つかりました
- その他(悩み相談・人生相談) 急遽濃厚接触者になってしまったのですが、自分は無症状で、でもなんとなく心配なのでPCR受けたいですが 1 2022/08/15 17:02
- その他(病気・怪我・症状) 新型コロナのPCR検査を受けるタイミングについてお教えください。 2 2022/04/13 10:21
- ホテル・旅館 旅行支援の為にpcrを受けるとして、旅行前日にpcrを受けた際に翌日のホテルに到着するまでに陰性証明 5 2023/03/03 21:27
- 政治 コロナが社会変革を目的とした茶番であることに気付いてる人はどれくらいいると思いますか?コロナは終わら 5 2022/07/15 17:01
- 病院・検査 至急回答お願いしますT﹏T 大阪で病院などではなくPCR検査をしている所ってありますか? 住んでいる 1 2023/08/02 01:03
- 政治 他国ではもう新型コロナウイルス騒動は化けの皮が剥がれて実質修理扱いでマスクも着用していないし規制も撤 2 2022/03/26 07:07
- 病院・検査 pcrに近い抗原検査をしたのですが、やっぱりpcr検査をしたいです。 違う病院でしても良いでしょうか 1 2022/11/29 16:26
- 政治 まだマスコミがただのPCR検査陽性者を感染者と間違った呼び方をしてコロナ恐怖煽りしているのをどう思い 2 2022/08/10 17:01
- 風邪・熱 PCRを自主的に受ける人は誰もPCRを受けなかったら「感染者」は0人になり、コロナ前の日常が戻ってく 3 2022/05/29 08:33
- 病院・検査 近頃では、PCR無料化事業の恩恵を受けるために、「今度帰省して、おばあちゃんに会うんです〜」みたいな 1 2022/06/25 11:41
おすすめ情報
デイリーランキングこのカテゴリの人気デイリーQ&Aランキング
-
PCRの失敗について
-
PCR組成とDNAのスメア
-
PCRで複数のバンドがでます。
-
末端複製問題について
-
PCRでDNAが増幅されないのは・・
-
エキストラバンドがでる理由
-
RT-PCRのランダム,オリゴdTプ...
-
oligo(dt)15 Primerの配列は、...
-
DNAを室温で放置してしまい、DN...
-
プラスミドへのインサート長が...
-
ゲノムDNAをテンプレートにして...
-
PCRの応用例
-
PCRでバンドが2,3本出てしまい...
-
シーケンスが上手くいきません...
-
DNAの塩基配列を決定するシーケ...
-
PCRの原理とDNA/RNAの生合成の...
-
サザンブロットのプローブを作...
-
PCRとシークエンス反応
-
転写反応には、どうしてプライ...
-
D-loopについて
マンスリーランキングこのカテゴリの人気マンスリーQ&Aランキング
-
PCRの失敗について
-
PCRで複数のバンドがでます。
-
PCRとシークエンス反応
-
転写反応には、どうしてプライ...
-
DNAを室温で放置してしまい、DN...
-
プライマーの劣化凍結融解について
-
PCRでバンドが2,3本出てしまい...
-
PCR組成とDNAのスメア
-
RT-PCRのランダム,オリゴdTプ...
-
エキストラバンドがでる理由
-
イノシン入りの縮重プライマー...
-
mRNA発現量を求める実験法
-
PCR プライマーの希釈
-
プライマーダイマーが出てしま...
-
定量PCRのスタンダード作製
-
rep-PCRって?
-
PCRのノンスペバンドの正体・・...
-
RT-PCRとリアルタイムPCRのプラ...
-
Long PCRのこつ
-
RAPDマーカーって何ですか?
おすすめ情報