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No.2ベストアンサー
- 回答日時:
時間が経てば非特異的、特異的に関わらず反応が進むのは当然です。
特異的反応がその反応の速さから比較的短時間でプラトーに達するのに比べ、非特異的反応は(ある程度までは)時間をかければかけるほど進むでしょう。特に二次抗体は一次よりも非特異的反応の余地が大きいのでオーバーナイトで長い時間をかければ当然、バックは上がることになるでしょうね、濃度しだいとは思いますが。
ブロッキングというのは所詮は非特異的反応です、あらかじめ非特異的反応を起すことで検出時の非特異的反応を下げるっていうだけなのでまったく万能という言葉からは程遠いです。もちろん、ブロッキング剤の種類と濃度によりますが。
よってブロッキングだろうが一次抗体だろうが二次だろうが適切な濃度、反応時間というものがあるというだけのことです。
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