![](http://oshiete.xgoo.jp/images/v2/pc/qa/question_title.png?e8efa67)
No.1ベストアンサー
- 回答日時:
DNA polymerase I には、伸長活性、一本鎖特異的3'->5' exonuclease活性(校正活性)、二本鎖特異的5'->3' exonuclease活性(nick translation活性)を持ちます。
Klenow fragmentは、このうち二本鎖特異的5'->3' exonuclease活性をもつドメインを欠損させたものです。DNA polymerase I で合成を行うと、反応のはじめのほうでは伸長反応が優勢ですが、ある程度反応させ基質(ヌクレオチド、伸長可能な一本鎖状態の鋳型)が減ってくると、合成された鎖を5'端から削っていきます。結果、収量、比活性が下がってしまいます。
二本鎖DNAにDNAse Iでnickをいれ、DNA polymerase I を使ってnickから伸長方向のDNAを削りながら新たなDNA鎖を合成させてラベルするnick translation法もありますが、反応時間による合成量と分解量の兼ね合いが難しい。
その点、Klenowを使うランダムプライム法なら、反応時間を長くしていっても、収量があがることはあっても、下がることはないので、失敗が少ないのです。
この回答へのお礼
お礼日時:2007/01/20 10:56
なるほど、Klenow酵素が5'-3'エキソヌクレアーゼ活性をもっていないというところがポイントなのですね。分かりやすい回答をありがとうございました!
お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!
似たような質問が見つかりました
- 生物学 ペントースリン酸経路について質問があります。 1 2022/04/17 15:37
- 薬学 【医学】体内のリパーゼという酵素を増やす方法を教えてください。 リパーゼ酵素自体を 1 2022/12/06 18:20
- 新卒・第二新卒 女性の就職活動(新卒採用)で、顔採用って本当にあると思いますか? 4 2022/06/07 11:30
- 就職 女子アナの採用選考は憲法違反ではないでしょうか? 3 2022/08/20 12:12
- 電車・路線・地下鉄 女性専用車は逆差別につながるのではないでしょうか? 6 2022/07/31 13:25
- 生物学 字が汚くてすみません 高校生物の酵素についてです。 なぜ酵素濃度を2倍にしたとき青色じゃなく赤色のグ 2 2022/08/28 12:29
- 大学・短大 女子大生(成人している大学2年以降の学生)の飲酒とリスクについて質問です。 5 2022/03/26 19:45
- 生物学 大腸菌とプラスミド 1 2022/07/04 01:40
- 医学 女性の飲酒の是非について 2 2022/03/26 16:40
- 化学 PNPG法で使う酵素とバッファーの量が違う理由 1 2022/07/02 16:51
おすすめ情報
デイリーランキングこのカテゴリの人気デイリーQ&Aランキング
-
なぜ大腸菌はグルコースとラク...
-
酸化的リン酸化ってなんですか?
-
早朝にセミが10分間くらい鳴く...
-
嫌気状態でATPを生成する代謝経...
-
糖とフルフラールについて
-
ピロガロールの自動酸化を用い...
-
D-グルコースとL-グルコースの違い
-
競合阻害と非競合阻害
-
dead-end阻害とは??
-
モル吸光係数の求め方
-
生物基礎の質問
-
腸内細菌についてお願いします
-
酵素の反応停止液について
-
消化って異化ですか?同化ですか?
-
タンパク質の収率
-
サテライトコロニー?について
-
DNAの抽出実験のトリプシンにつ...
-
DNA塩基配列から推定されるアミ...
-
卵白アルブミン=オボアルブミ...
-
RNAの電気泳動について
マンスリーランキングこのカテゴリの人気マンスリーQ&Aランキング
おすすめ情報