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A 回答 (2件)
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No.2
- 回答日時:
説明足りず申しわけありません。
SAH、LAHというのは、組替の際にinsertの前後に付ける相同領域の短腕、長腕のことで、short arm of homology、long arm of homologyのことです。
プローブの設定については、200-2000bpほどの特異性が高い配列を選択します。
・プローブを作製する予定のゲノム領域にprimer3(http://frodo.wi.mit.edu/cgi-bin/primer3/primer3_ …)でプライマ設計
↓
・blast(http://blast.ddbj.nig.ac.jp/top-j.html)でアラインメント検索し、特異性を確認
といった流れです。
No.1
- 回答日時:
・ゲノムを制限酵素処理した際に野生型と相同組替クローンで検出部位の断片サイズが異なる酵素を選択
・プローブは制限部位~SAH又は制限部位~LAHの間に設定
・プローブのラベルには必ずしもRIは必要ではない
参考URLに私が使っていたnon-RIキットのカタログを貼ってあります。
個人的にはRIラベルの方が好みなのですが、時流はnon-RIらしい・・
参考URL:http://www.roche-biochem.jp/catalog/index.php/pr …
この回答への補足
回答ありがとうございます。プローブの設定部位は分かるのですが、DNA断片はどのように取ってきたらいいのでしょうか?あとSAH、LAHとは何の略語でしょうか?なにぶん、初心者ですみません。
補足日時:2007/08/13 23:12お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!
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