大腸菌培養液 ずっと使えますか？

研究で組み換えタンパクを作っているものです。
タンパク発現をさせる際に、5mlのスモールカルチャーから3mlとり、500ml培養液で発現させるというのをしているのですが、かなりのペースで繰り返しています。
そこで思ったのですが、このスモールカルチャーの液はずっと使ってもいいのでしょうか？つまり、また3mlほど液を足して培養し、3mlをラージカルチャーへ、というのを半永久的にできるのでしょうか？
プレートから拾ってくるよりも短時間で増えるので、可能なら楽になるのですが・・・。

No.2 ベストアンサー 回答者： oil-sour 回答日時： 2009/02/07 09:36

プラスミドに変異が起こる可能性があるので、できれば１～２週に一度のペースで凍結ストックから起こし直すことをお勧めします。

組み替えタンパク質とのことなので、抗生剤をどこかでうっかり忘れると、たちまちプラスミドも失われる・・・可能性もあります。

No.3 回答者： RNase_P 回答日時： 2009/02/07 19:06

コンタミの可能性が跳ね上がりますし

抗生物質によってはプラスミドが落ちる可能性も高いです。
発現状態も変わることがありますし
オススメできません。

No.1 回答者： ga111 回答日時： 2009/02/06 20:41

ダメなときも、いいときもあります。

何回かやって大丈夫なら、その回数までは大丈夫ということです。

ダメな場合というのは、発現系が良すぎる、蛋白が菌に有害な場合などです。菌がそのプラスミドを嫌います。プレート上でもそれは起きます。

私は、つねにダメな場合を想定して、フレッシュに形質転換します。

この回答へのお礼

ご回答ありがとうございます。
やっぱり地道にやるしかないんですかね。

お礼日時：2009/02/06 21:25