半保存的複製の証明実験での証明方法について質問があります。

以下、重いDNAをH、軽いDNAをL、中間の重さのDNAをMとします。

メセルソンとスタールは大腸菌のDNAを全てHに変えた後、DNAが複製される度に密度勾配遠心法でDNAの密度を調べることで、半保存的複製を証明しましたよね?
実験結果より二回複製すると、MとLが出来たのは分かります。
しかし、本当に半保存的複製を証明するためには、MとLが等量出来ていることを証明しないといけないと思うのですが、彼らはそれをどのように証明したのでしょうか?

ご存知の方がおられましたら、ご教授くださいm(__)m

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A 回答 (1件)

密度勾配遠心法でMとLに分離した後、どう検出したか…


確かに、高校の教科書では触れられてませんね。

質問の実験では、「DNAが紫外線を吸収する」という特性を利用してDNAを見えるようにしています。

具体的には、密度勾配遠心法でMとLに分離した状態の遠心管に紫外線をあてると、DNAのある部分がうっすら暗く見えるので、見えた線の濃さでDNA量を推定しています。
ソース(英語です):http://semiconservative.askdefine.com/

この方法は目視レベルでの検出方法としては非常に低感度なため、現在はほとんど使われていません。
このことから、教科書で触れられていないのでしょう。


おまけ:
・現在はDNAを高感度に検出できる蛍光色素(エチジウムブロマイドなど)で染色する方法が主流です。
紫外線をあてると蛍光色素と結合したDNAが強い蛍光を放ち、その光り具合でDNA量を推定することができます。
・溶液中のDNA濃度を測定する方法としては、現在も紫外線の吸収を利用しています(目視ではなく、専用の機械を使う必要がありますが)。
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この回答へのお礼

DNAは紫外線を吸収するんですか!
初めて知りました。

現在使われている方法まで詳しく解説していただき、大変勉強になりました。

ご回答、ありがとうございましたm(__)m

お礼日時:2012/10/14 18:25

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当然これに付随する「氏名・住所・電話番号」もです。

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(固定標本でエンドサイトーシスが起こることはないのでそもそも本質的に証明不能)

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もし動物実験がダメなことと言うなら自分が皮膚炎に掛かったときに、これ動物実験できなくなったから試してないけど塗っていい?と言われたら人間が実験台になる人間実験の時代になるわけですよね?

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もし動物実験がダメなことと言うなら自分が皮膚炎に掛かったときに、これ動物実験できなくなったから試してないけど塗っていい?と言われたら人間が実験台になる人間実験の時代になるわけですよね?

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Aベストアンサー

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今まで化粧品をうさぎの目に垂らすという実験が行われていたのですが、それは人間の肌に有害かどうかを裏付ける物ではないとの科学的結果が出たのです。
だから、無駄に動物をいためつける実験はやめようと言っています。
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市町村などの地方自治体内の各病院が共通に使える電子カルテシステムの記事がありました。

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いつもお世話になってます。
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的はずれであったらご容赦願いたいのですが,この話はDNA複製の話なのでしょうか。それとも組換えの話なのでしょうか。

DNA複製に関しましては,3つの仮説がありました。
(1)半保存的複製…二重鎖が分離し,一方が新しく合成される。これをメセルソンとスタールが証明したわけです。
(2)保存的複製…元のDNA鎖は,そのままで新たに同じDNA鎖が合成される。
(3)混合複製(分散的複製)…元の物と,新しい物がブツ切れの状態で複製される。ホリデイの説です。

ここでDNAの複製に関しましては,メセルソンとスタールの半保存的複製が正しかったわけです。半保存的複製については省略します。

しかし,遺伝子の組み換えに関しましては,ホリデイ・モデルが正しかったわけです。ホリデイモデルにつきましては欄外URLを参考にしてください。

2つの事項を1つにお考えではないのか,それとも遺伝子の組換えでメセルソン・モデルが有るのか,どちらなのでしょう。素人が反対に質問ですが,ご教示下さい。

参考URL:http://nitro.biosci.arizona.edu/courses/EEB320-2003/Lecture30/Lecture30.html

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