蛋白の分子量（kDa）を調べる方法

かなり低レベルな質問なのですが、、、、
分からなくて困っています
約７５０個のアミノ酸からなる蛋白の分子量を知りたいのですが、どうやって調べたらいいのでしょうか？
よろしくお願いします

No.2 ベストアンサー 回答者： geneticist12 回答日時： 2006/04/03 19:35

アミノ酸配列データがあるなら、計算してくれるソフトウェアがあります。

市販の遺伝子解析ソフトウェアには必ずついている機能ですが、ウェブ上でできるサイトもあります。たとえば

http://us.expasy.org/tools/pi_tool.html

実験的に調べるなら、SDS－PAGE、ゲルカラムクロマトグラフィ、TOF-MASSなど、材料や精度に応じていろいろ方法があります。

この回答へのお礼

ありがとうございました☆　早速やってみて、ばっちり値が分かったので大助かりでした
便利なサイトがあるもんなんですね。。。
何より、教えていただいてありがとうございました

お礼日時：2006/04/03 22:11

No.1 回答者： kgu-2 回答日時： 2006/04/03 13:43

1) アミノ酸の種類と数が分かっているなら、各アミノ酸の分子量×数を合計す。

ただし、ペプチド結合の水の重さは、引いて下さい。

2)　実験では、アミノ酸の種類は不明ですので、以前は、セファデックスでやっていました。750個だと、アミノ酸の平均分子量が100とすると(一般のタンパクは、100～110でしょう)、分子量は75000と推定されるので、セファデックスの200くらいが適当かも。
　現在は、高速液体クロマトグラフィーが多いかと想いますが、使ったことがないので。

3) 超遠心をかける、というのもあるようですが、私の学生時代の教科書には、ありました。

　750個という数が信頼できる数字なら、75000から80000と推定できます。より正確には、アミノ酸分析をして、アミノ酸の数を比例配分して、あとは単なる掛け算と足し算です。

この回答へのお礼

なるほど！！勉強になりました。
やはり基本が大事なんですね。アミノ酸の分子量を調べればいいんですね
丁寧な、わかりやすい回答ありがとうございました

お礼日時：2006/04/03 22:08