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No.2ベストアンサー
- 回答日時:
T4 DNA polで末端のリン酸基がはずされる反応はありません。
T4 polで平滑化するのは簡単そうな反応ですが、じつは非常にトリッキーです。T4 polは3' exonuclease活性を持ち、3'突出末端を削る平滑化もできますが、活性が強いので二本鎖部分でも容易に3'末端を削り込んで陥没させるので、平滑化の失敗が起こりがちです。
酵素量を下げる、反応温度を下げる、反応時間を短くする、反応後の失活を速やかに行う(高温で失活させようとすると、失活する前に高温で削れこみが促進する可能性があるので、フェノール抽出がよい)などでコントロールします。
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