![](http://oshiete.xgoo.jp/images/v2/pc/qa/question_title.png?5a7ff87)
動物の全血液と脾臓からRNA抽出(PureLink RNA Mini Kit)を実施しました。
その結果、全血はRNA40ng/μL、260/280比が2.25となり泳動は2本のバンドを確認しました。
その際、1%アガロースゲルでは1本しかバンドが見えず、2%アガロースで2本見えました。
長さは1.5kb以上と800bpです。
また、脾臓はRNAlaterに1週間ほど室温で浸漬後、抽出しました。
RNA1300ng/μL、260/280が2.0でしたが、2%アガロースゲルの電気泳動では1.5kb以上のバンドが1本しか認められませんでした。
RNA抽出の精度の確認がよくわからず、この抽出法でよいか迷っています。
ご教授お願いいたします。
No.1ベストアンサー
- 回答日時:
この抽出方法でしたら、最後の溶出でミスしない限りそうそう壊れないはずです。
抽出法よりも、前処理と抽出後の確認方法をしっかりさせるべきではないでしょうか。
>脾臓はRNAlaterに1週間ほど室温で浸漬後、抽出しました。
長過ぎませんか?冷凍保存はできませんか?
「RNAlater®溶液中で保存されたサンプルは、冷凍・冷蔵条件で輸送できます。一晩の輸送であれば室温でも可能です。」
http://ja.invitrogen.com/site/jp/ja/home/Product …
基本的に28S rRNAと18S rRNAの量比とバンド性状で判断するので、2%ゲルではゲル濃度が高過ぎではないでしょうか。
それと、RNAを変性させた状態で泳動する様にして下さい。
熱変性やホルムアルデヒドゲルの使用など、メジャーな方法ですので調べればすぐ出てきます。
ゲルトレイや泳動槽もRNase-freeの状態でご用意下さい。
DNAと違って手間がかかりますが、慣れるまで辛抱です。
グッドラック!
ご回答ありがとうございます。
前処理と確認方法をおっしゃる方法で実施していみたいと思います。
何分、RNAは初心者でして、DNAと違ってかなり作業が多く、戸惑っております。
再チャレンジいたします。
お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!
似たような質問が見つかりました
- 生物学 大腸菌とプラスミド 1 2022/07/04 01:40
- 生物学 mRNAとtRNAについて 1 2023/01/17 16:59
- その他(ニュース・時事問題) 中国は、コロナの弱毒化の確認場&コロナ感染政策の実験場? 1 2022/12/28 23:55
- 生物学 シャトルベクターの大腸菌への形質転換 1 2022/07/02 23:19
- Visual Basic(VBA) リストポックスへの抽出方法 1 2022/08/10 17:58
- 統計学 不偏分散について 3 2022/03/29 15:57
- Excel(エクセル) 【詳しい方教えて下さい】EXCEL条件に一致する値の複数抽出 9 2022/04/29 10:56
- Excel(エクセル) Excelマクロの差分抽出のコードを教えていただきたいです。 2 2023/03/14 11:40
- その他(データベース) Accessのクエリで1フィールドの抽出条件設定をNullでなく全角半角含む空白のみの文字列でない文 1 2023/04/24 15:20
- 生物学 セントラルドグマの流れはこれであっていますでしょうか? DNAの遺伝情報がRNAポリメラーゼによって 2 2022/09/09 22:13
デイリーランキングこのカテゴリの人気デイリーQ&Aランキング
マンスリーランキングこのカテゴリの人気マンスリーQ&Aランキング
-
制限酵素地図の作成
-
電気泳動のスメアバンド
-
電気泳動によりDNAの分子量を求...
-
DNA電気泳動で困ったことが起こ...
-
バンドの濃さから求めるDNAの量
-
電気泳動写真からの濃度の求め方
-
アガロースゲル電気泳動でサン...
-
DNAの電気泳動の際に使うバッフ...
-
RNAの電気泳動について
-
DNAの電気泳動法による長さの測定
-
λDNAとはなんですか?
-
電気泳動
-
ImageJの使い方についてお教え...
-
制限酵素地図の作成方法(すみま...
-
電気泳動のDNAバンドが出ないです
-
エチブロの処理
-
ペクチンの抽出の原理
-
DNAを一晩、常温保存してしまい...
-
PCR法の結果のバンドで・・
-
エチジウムブロマイドについて
おすすめ情報