酵素電気泳動法について

酵素電気泳動法についての質問です。
プロトコールが掲載されている文献を読むとSDS-PAGE後、SDSを取り除くために、Triton X-100を含む酢酸ナトリウムバッファー（ｐH5.0)中でインキュベートするようなのですが、この時に使うTriton X-100は脱イオンカラム（具体的には AG 501-X8, Bio Rad)を通して精製しておくと書いてありました。

質問は、何故、非イオン性界面活性剤であるTriton X-100を精製しなければいけないのかということなのですが、購入するものには結構イオン性物質が入っていてそれがSDSの除去を阻害するからなのでしょうか？それとも別な目的があるのでしょうか？また、やってみればいいのでしょうけど、精製しなければうまくいきづらいのでしょうか？
もし、わかる方がおられましたらよろしくお願いいたします。

No.1 ベストアンサー 回答者： gori8063 回答日時： 2006/07/07 22:38

SDS-PAGEの後、どのようなことする実験系なのでしょうか？　

Triton-X自体は試薬ではありますが、不純物が入っている場合もあるようです（工業製品ですし）。

普通に考えて、SDSの除去に悪影響を及ぼすのではないと思いますが。
ちなみに、SDSの除去は「インキュベート」だけでいいのですか？　透析やエレクトロエリューションのような方法ではないんですよね。

この回答への補足

ご回答ありがとうございました。

文献のほか、こちらの方の質問・回答も拝見しました。
http://oshiete1.goo.ne.jp/kotaeru.php3?q=2174405

予めゲルの中に基質を入れておき、電気泳動後にゲル中で酵素の活性を見る方法（基質によって染色したり、UVを当てると酵素反応した部分が発光？しなくなったり）です。native-PAGEを使って酵素活性を見る方法もあるようですが、この方法（Triton X-100を使ってSDSを取り除く）だとSDS-PAGE後でも酵素活性をみることができるようです。上記の方の回答の中で「緩衝化していない Triton X-100 中でのインキュベーションにより、SDS はゲル (つまり、ザイモグラム) から除去され、」と書かれているので、購入するものには緩衝作用があるからTriton X-100を脱イオン処理しなければいけないのかと思ったのですが、はっきりはわかりません。文献には自分が質問した内容のように「脱イオンカラムを通して精製したTriton X-100を含む酢酸ナトリウムバッファー（ｐH5.0)中でインキュベートした」と書かれているだけで、どうして精製しなければいけないのかは書いていません。それにバッファー中でインキュベートと書いてありますし。
自分でも他の文献等を当たって調べたいと思います。

補足日時：2006/07/10 10:44

この回答へのお礼

ありがとうございました。

お礼日時：2006/07/17 17:56