プライマー溶解 希釈濃度

収量２０nmolの乾燥プライマーをTEで溶解するのですが、最終濃度は10pmol/μlで使います。
この場合、200μlのTEで溶解すると、１００pmol/μl。これを１０本に分注して保存。
１本は20μlで２０００pmol/μl。１８０μlのTEを加えて全体を２００μlにすれば１０倍希釈で、１０pmol/μlになります。
PCRで１ウェルあたりの反応液に使うプライマーは０．４μlです。
分注した１本で500ウェル分？！
こんなに沢山できちゃうものでしょうか？
大変不安になっています。
私の計算がどこかおかしいのでしょうか？
すみませんが、検証していただけないでしょうか・・。
どうぞよろしくお願いいたします。

No.1 ベストアンサー 回答者： yanachu 回答日時： 2011/11/07 11:04

>１本は20μlで２０００pmol/μl

→　100pmol/μl 　（あるいは　2000pmol/20μl）

が正しいですが、なぜかその後の計算はあってるのでタイプミスでしょうね。


最終　10pmol/μl で使用し、１ウェルあたり0.4μl使用　ということは、１ウェルあたり　4pmol 使用することになりますね？

もともと20nmol あるのですから、20nmol ÷　4pmol　＝5000　ウェル分

１０本に分注してるので500ウェル分で、計算はあってますね。

１ウェルあたり使用するプライマーが0.4μl、が合っているなら、間違いないでしょう。

他の質問も見てみましたが、
http://questionbox.jp.msn.com/qa1836835.html

だいたい1000ウェル分くらいは取れるみたいだし、合ってるんじゃないでしょうか。

この回答へのお礼

お返事有難うございました！
はい、おっしゃる通りタイプミスでした。
分注すれば一本20μlあたり2000pmol入っていることになるので、1μlあたりは100pmol。
１０倍希釈すれば目的の10pmol/μlになるだろうと。
合ってて良かったです。
希釈間違えたら大変だと思って、不安でした。
乾燥状態の収量からも、使用量から何ウェル取れるのかという検証ができることに思い至りませんでした。
本当に有難うございました！！助かりました。

お礼日時：2011/11/07 17:32