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ジデオキシ法に用いるプライマーはどのように決定するのですか?
塩基配列を知りたいからシーケンスを行うのだから、鋳型DNAに特異的なプライマーを設計するのは無理な気がするのですが…
レベルの低い質問で恐縮ですが教えてください

A 回答 (3件)

1.クローニングベクターに入れて、ベクターにアニールするプライマーを用いる


2.適当な配列をライゲーションして、そこにアニールするプライマーを用いる

一度、クローニングについて調べてみましょう。

この回答への補足

回答ありがとうございます。
よく分かりました。
クローニングについてもっと勉強してみます。

補足日時:2008/11/24 12:05
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googleで一発目に出てくる記事ですが、わかりやすいです。


http://www.jpo.go.jp/shiryou/s_sonota/hyoujun_gi …

ジデオキシ法(サンガー法)についてはここを見ればよくわかるかとおもいます。
ちないに、まったく未知の領域をライブラリの中から見つけ出した後シークエンスを決定したい、という場合はライブラリベクター側の配列を使う訳です(いわゆるM13 primerなど)。

この回答への補足

回答ありがとうございます
M13よく本で見かけます。もっと自分で勉強するべきですね
頑張ります

補足日時:2008/11/24 12:11
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ターゲットがある程度分かっているのならば、そのターゲットに保存されている領域にプライマーを設計すればいいのでは?


そもそもシークエンス用にPCRを使うのであれば、PCRに使ったプライマーでシークエンスすればいいのでは?

この回答への補足

回答ありがとうございます。
よく分かりました。

補足日時:2008/11/24 12:13
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