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No.1ベストアンサー
- 回答日時:
伸張反応の温度まで上げることができます。
2℃か3℃刻みで上げてみるということを
試してみたらいかがでしょうか。
例えば伸張反応を72℃でやっているのであれば、
アニーリング温度は66℃、68℃、70℃、72℃と
条件を振ってみるというふうに。
No.3
- 回答日時:
わたしもNo.1さんのように条件を振ってやるようにお勧めします。
あとはstep-down PCRでやるという手もあるでしょう。それで改善しなければ、Primerを設計し直した方が良いと思いますよ。
No.2
- 回答日時:
用いているプライマーのTm値の上下5度ぐらいで反応させると増幅させやすいです。
この場合、特異性を上げたいのですから、最大でTm値プラス5度まで上げてみるとよいでしょう。
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