アルカロイド（TLC.HPLCについて）

ＴＬＣおよびＨＰＬＣで成分が分離するのはなぜか？

No.1 ベストアンサー 回答者： kawakawa 回答日時： 2000/12/09 19:28

基本的な原理はペーパークロマトグラフィーやチョーククロマトグラフィーと同じもので、吸着力と溶解度のバランスに基づいていますネ。

ＴＬＣの場合、通常はシリカゲル、場合によってはアルミナを用い、ＨＰＬＣではＯＤＳなどを用いることが多いですが、いずれにしても、分離対象となる物質のアルキル基などがそれらに吸着するのですよネ。そして、ＴＬＣの場合は自然の溶媒の上昇、ＨＰＬＣの場合はポンプによる溶媒の流れと、吸着率のバランスによって分離するのですネ。いずれの場合も、溶媒の極性によって溶解度は変化しますので、純相のＴＬＣの場合は酸や水を加えてＲｆ値を下げたり、逆相のＨＰＬＣの場合はアセトニトリルやメタノールの率を上げてリテンションタイムを早くしたりします。また、ＨＰＬＣの場合は温度が高いと吸着率が低くなるので、カラムオーブンで加温し、リテンションタイムを早くする方法も用いられますネ。
対象物質の構造式が僅かでも異なっていれば（光学異性体であっても）、Ｒｆ値やＴｒに差をつけることは可能です。
もし、ＨＰＬＣを実際に使っておられるのであれば、使用説明書と共に解説書がついていて、そこに詳しい理論解説がされていると思いますヨ。
以上Kawakawaでした

No.2 回答者： MiJun 回答日時： 2000/12/09 20:04

kawakawaさんの回答に少し補足です。

１．「BioLad」等のカラム用品を扱っているメーカーに請求すればＨＰＬＣの基礎的説明書が手に入ります。
２．一般のＴＬＣ・ＨＰＬＣ・ＧＰＣ等の分離原理に関しては成書が沢山ありますのでそれらを参考にされると良い思います。
・ＨＰＬＣ入門／Ｓａｎｄｙ　Ｌｉｎｄ…［他］／廣川書店／１９９８．６　
・Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　ＨＰＬＣ　Ｓｙｍｐｏｓ…／Ｋａｎｓａｉ　Ｓｅｍ…／１９８５．　
・キラル分離／Ａ．Ｍ．Ｋｒｓｔｕｌ…［他］／廣川書店／１９９７．５　
・蛍光分析化学／Ｇ．シュベット／培風館／１９８７．６
・高速液体クロマトグラフィーの実際／Ｌｌｏｙｄ　Ｒ．Ｓｎ…［他］／東京化学同人／１９９２．３　
・高速液体クロマトグラフィー／Ｆａｌｌｏｎ［他］／東京化学同人／１９８９．９　
・生体高分子の高速液体クロマトグラフィー／Ｒ．Ｗ．Ａ．Ｏｌｉｖ…［他］／

これら以外にも洋書もあります。

ご参考まで。