免疫染色初心者です.よろしくお願いします.
血管内皮細胞,線維芽細胞,心筋細胞の特異的タンパクを染めるのに,Von Willbrand factor(rabbit),DDR2(rabbit),α-actinin,2次抗体としてgoat anti-rabbit IgG等の抗体を用います.こういう場合の1次・2次抗体の濃度はやはりある程度100倍,1000倍なり自分で希釈してみて決めるしかないのでしょうか?他の方の質問も拝見して,自分で調べるしかないのかなとは思いましたが,どの濃度で一番反応が出やすいというのはないのでしょうか.よろしくお願いいたします.
No.1
- 回答日時:
抗体の親和性や、組織によってもシグナルの強度が変わるので、一概には言えません。
自分の場合は一次抗体200倍二次抗体500倍といった数値を目安としてましたが、こういった調整がうまくいかないと、シグナルが検出されなかったり、バックグラウンドが強くなりすぎたりするので、よく検討されるとよいと思います。もし、その抗体が人からもらったものならば、その人に適切な濃度を聞くとか、また購入したものなら、その抗体を用いた論文を参考にされてはいかがですか?No.2ベストアンサー
- 回答日時:
なにしろ製造ロットによっても力価がばらつくし、抗原の量や濃度
によっても見えやすかったり見え難かったりなので、ある程度は自
分で決めてくしかないと思います。まぁ、とりあえず100倍くらいで
染めてみて、不満がなければそのままGo!ってのもアリでしょうね。
それか、DAKOあたりの「順番にかけるだけで、医者でも染められ
る」と豪語しているヤツを使うんですね。あそこはカタログに、推
奨希釈率を載せています。第VIII因子なら、50倍くらいで使えって
親切に書いてありますよ。とりあえずそれに従ってれば、大コケは
しません。本当はもっと薄くても染まるんですが。
ご返信ありがとうございます.
DAKOのHP行ってみました.
かなり詳しく載ってますね.
WAKOは知ってますが,DAKOは知りませんでした.
ありがとうございました.
お探しのQ&Aが見つからない時は、教えて!gooで質問しましょう!
似たような質問が見つかりました
- がん・心臓病・脳卒中 ハスミワクチンによるがん治療について 11 2022/08/07 13:41
- その他(ニュース・時事問題) ようやくこのような話が… 2 2022/12/09 22:21
- 生物学 ネットを見てると大規模な?研究を出してきて、ワクチンは打たない方がいいという話があります。本当? 5 2022/08/19 20:09
- がん・心臓病・脳卒中 癌細胞について 4 2023/01/22 19:11
- その他(病気・怪我・症状) 新型コロナワクチンを 2回以上接種すると 免疫寛容発生する、免疫崩壊する論文が出たそうです どうお感 13 2023/01/23 15:16
- 医学 昨日のカズレーザー番組みた?CARーT細胞 4 2023/05/17 08:18
- 生物学 生物基礎について質問です。 細胞性免疫において、キラーT細胞はウイルスに感染した細胞や病原体を直接攻 1 2023/03/04 10:28
- 泌尿器・肛門の病気 膀胱炎から腎感染に悪化したかどう検査なしで知る方法 1 2022/05/17 21:33
- 皮膚の病気・アレルギー ワクチンは打ちすぎると危険でないですか 5 2023/05/13 10:57
- その他(病気・怪我・症状) 新型コロナワクチン接種後の抗体原罪についてどう思われますか? 今のワクチンはアルファ株、デルタ株に対 4 2022/05/19 14:57
おすすめ情報
デイリーランキングこのカテゴリの人気デイリーQ&Aランキング
-
ウェスタンブロットのサンプル...
-
バルク溶液
-
ウェスタンブロット法での非特...
-
IBとWBの違いは?
-
ヤギ抗ウサギ抗体?
-
pan-ERKとは何でしょうか?
-
抗体で、isotype controle とは...
-
抗体、タンパク質の扱い方
-
免疫染色やウエスタンブロットで
-
ブロッキングって必要なのでし...
-
血液型の違いって簡単にいうと...
-
免疫原生と抗原性の違い
-
免疫染色の原理について
-
ポリクロナール抗体の濃度調整...
-
免疫組織染色.抗体タグは種類...
-
世代時間の計算(微生物学)
-
パラフィン切片薄切のコツ
-
トランスフェクションでの培地...
-
ヨーグルトは腐らないって本当...
-
PBSとTBSの使い分けについて
マンスリーランキングこのカテゴリの人気マンスリーQ&Aランキング
-
ウェスタンブロットのサンプル...
-
IBとWBの違いは?
-
バルク溶液
-
抗体価って何ですか?
-
ABC法について
-
抗体の保存方法について
-
【緊急】CBB染色では確認できな...
-
抗体の免疫動物と交差性について
-
抗体、タンパク質の扱い方
-
O型はA型、B型、AB型に輸血できる
-
ブロッキングって必要なのでし...
-
ヤギ抗ウサギ抗体?
-
蛍光免疫染色封入時のパップペ...
-
santacruzの抗体
-
抗体で、isotype controle とは...
-
ウエスタンブロットで二次抗体...
-
Rh血液型のDuを調べています
-
pan-カドヘリンとは?
-
免役グロブリンクラススイッチ順序
-
抗体を希釈する際の溶液について
おすすめ情報