プロが教えるわが家の防犯対策術!

PCRについての知識はあまり無く、はじめて、PCRをします。
RAPD法を行ないたいと思い、長さ10merのオリゴマーというものを購入し、これをプライマーとしました。
しかし、内容量 0.5OD、Tm値 32℃としか説明書には 書いてないのですが、
プライマー濃度を1μMにするには どうしたらよいのでしょうか??どのように 計算してよいのか わからず大変困ってます。どうか、宜しくお願いします。

A 回答 (3件)

PCRはよくやっています。


プライマーの濃度ですが元の濃度がわからないと稀釈はできません。
プライマーが入っているチューブに濃度がかいていませんか?
私が使っているプライマーは100μMで送られてきて5μMに稀釈してます。
方法は95μlの滅菌水に5μlのプライマー原液をいれてプライマー100μlをつくっています。
ricottinさんの場合は元の濃度がわかりませんが
もし100μlのプライマーを作りたいなら濃度が100μMなら99μlの水に1μMのプライマー原液をいれればいいです。
濃度が違うなら
終濃度(ここでは1μMなので1でいいです)/原液の濃度×作りたいプライマー量でできます。
参考にしてください
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この回答へのお礼

ありがとうございます。しかし、プライマーのチューブも箱も見たのですが どこにも濃度は書いてないのですが・・・。こういう場合は どうしたらよいのでしょうか??

お礼日時:2003/01/15 04:19

ODって吸光度の単位でしょ?


吸光度で濃度があらわせるのは知ってますよね?
そもそもDNAなら260nmの波長で濃度をはかるから計算できますよ。


ってゆーか液状で送ってきたんですか?フリーズドライではなく?
ま、それならふつーは濃度書いててくれてもよさそうなもんだけど

参考URL:http://www.invitrogen.co.jp/jp_prdct/pdf/2002-32 …
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この回答へのお礼

フリーズドライで送られてきました。しかし、説明という説明はなく、困ってました。製造元に問い合わせてみます。URL参考にさせていただきます。ありがとうございました。

お礼日時:2003/01/15 22:46

> プライマーのチューブも箱も見たのですが


> どこにも濃度は書いてないのですが・・・。

 ご質問文に『内容量 0.5OD』と書かれていますが,これに関する説明は書かれていませんか?

 よく分からなければ,製造会社に問合せるのが一番確かです。電話ででも構わないと思います。
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この回答へのお礼

ありがとうございます。内容量についても 説明が書いてないので 問い合わせてみます。

お礼日時:2003/01/15 22:40

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