【緊急】ソモギ法の滴定

還元糖の定量にソモギ法を用いています
最後にチオ硫酸ナトリウムで残存ヨウ素を滴定するのですが、指示薬のでんぷんの青紫色が消えて、滴定を終了させても、しばらくするとまた青紫色があらわれ、いつまでたっても滴定が終わりません。
なぜなのでしょうか、どうしたらよいのでしょう？

具体的な手順は、

サンプルの調整
　０．８M酢酸緩衝液に溶かしたデンプンをβアミラーゼとプルラナーゼで処理
　↓
熱湯処理で酵素失活
　↓
5倍に希釈しソモギ法へ

ソモギ法

試薬

Ａ　銅試薬
・硫酸銅８．０ｇ
・ロッセル塩　３０ｇ
・無水炭酸ソーダ(Na2CO3)　３０ｇ
・１Ｎ苛性ソーダ　４０ｍｌ
・無水硫酸ソーダ液(Na2SO4)　１８０ｇ／７００ｍｌ
・沃度カリウム(KI)　８ｇ／少量の水
Up to 900ml
・１Ｎ沃素酸カリウム液(KIO3) 5ml or 12ml
Up to 1L

Ｂ　２Ｎ硫酸液

Ｃ　チオ硫酸ソーダ液　Na2S2O3 5H2O 　１．２４ｇ　を１Ｌとする

Ｄ　デンプン溶液（指示薬）

操作　
太目の試験管（２５＊２００）　に　試料（＋水）　５ｍｌ
　↓
Ａ銅試薬　５．０ｍｌ加える
　↓
煮沸湯浴中　１５分（マルトースの場合２０分）
　↓
水冷
　↓
２Ｎ硫酸　１．０ｍｌ
　↓
チオ硫酸ソーダ液で滴定

　
＊今回の操作では、指示薬を入れる前から青紫色を呈していました。酵素の失活処理が足りなかった可能性もありますが・・
思い当たる箇所がございましたら教えて下さい
お願いいたします

No.2 ベストアンサー 回答者： kgu-2 回答日時： 2006/01/24 20:21

チオ硫酸ナトリウムで還元しているわけですから、空気中の酸素は、酸化剤として作用するハズです。

　私の場合は、過マンガンカリウム消費量を測定させていました。これは、還元剤としてシュウ酸を使い、過マンガン酸カリウムの消失まて滴定させますが、滴定終了後に、学生に「色がまたついた」と、放置している間に酸化されて色がつきました。

>Cu２Oの結晶が多いものほど
　酸化洞は、触媒ではないのですか。反応式を知らないので、なんともいえないのですが。金属の中で、銅、鉄、マンガンは、触媒に使われます。
　マンガンについては、酸素を水酸化マンガンと反応させ、マンガン酸の形にして、それをチオ硫酸ナトリウムで滴定したことはあります。この場合は、酸素量は、もろにマンガン酸の沈殿の量と比例していました。
　この測定法も、酸化剤をすべて酸化銅にするのでしょうか。それでも、放置後に紫色になることとは無関係です。

>どうしたらよいのでしょう？
テキストに「しばらく、無色の状態がつづくまで」のような記述があると想います。
　もうお分かりでしょうが、「しばらく」というところがキーで、長時間では色が元に戻る、ということです。普通は、3分程度でしょう。私は、1分で程度ですが。

　それからお気づきでしようが、滴定時に、攪拌が過ぎると、空気中の酸素と反応させていることになりますので。
　中和滴定の場合は、無意識に、空気中の二酸化炭素と反応させています。
>色が戻るものともどらないものがあります
　反応には、時間がかかります。瞬時には、反応しません。空気中の酸素と液体の反応ですから、激しく攪拌しないかぎり、接触面積が小さく、徐々にほんのり色がついていきます。
　チオ硫酸ナトリウムがほんの少し多いだけでも、色がつくまで反応するのは、時間を要します。

No.1 回答者： kgu-2 回答日時： 2006/01/24 10:19

　滴定後は、空気中に放置してあるので、・・・。

滴定後に、溶液を2つにわけ、一つは冷蔵庫に保存してみて下さい。
　学生さんだと想いますが、なかなかこんなことには気づきません。院生なら、・・・。丁寧に書かないほうが良いと勉強になるかと。他の方が、書き込まれるかもしれませんが、3日たっても思いつかなければ、ご質問を。

　フェノールフタレインを加えて、水酸化ナトリウムで中和滴定して、色がついたので放置しておくと、そのうち色が消えます。これも空気が原因です。もちろん、物質は、違いますが。

　私が気がついたのは、40過ぎてからですので、エラそうに書き込めないのですが。

この回答への補足

えっと空気中の酸素が還元された銅を酸化して
反応が逆に進み、遊離ヨウ素がI2になってでんぷんに
取り込まれるのでしょうか？

申し訳ないことに上で書き忘れてしまったのですが、
色が戻るものともどらないものがあります

還元糖濃度が高く、Cu２Oの結晶が多いものほど
元に戻りやすいようなんですが・・

補足日時：2006/01/24 18:52