陰イオン交換クロマトグラフィー；早急な解答求！！！

イオン交換クロマトグラフィー；至急解答おねがいします。
いま、ある酵素を精製しているのですが、陰イオン交換カラムから溶出後の失活が目立ち、先生から、「移動相に対イオンをいれなさい」との助言を得ました。原理的な理由がわからないので教えてください。明日には実行したいのですが、先生も出先で連絡がとれないので困ってます。ネットで調べても参考になる情報がみつからないのですが、これは一般的なことなのでしょうか？どうかよろしくお願いします。

No.1 回答者： flotilla 回答日時： 2011/02/20 10:26

普通はスルーなのですが、急いでいるようなので。

　　　

　　　私は酵素の事はわかりません。

陰イオンのクロマトを行う目的は？精製、分離解析、定量？、オープンカラムなのか装置による分析カラム、分取、固相？

その酵素の失活とはどうなると起こるのか（ｐＨとか関係しない？）？

もう少し弱いカラムではだめなのか？

イオン対の事が（理屈が）判っているのか、あるいはイオン対の種類についての質問なのか？

抽象的過ぎて答えようがありません。（イオンペアで検索は？）

この回答への補足

対イオンを一般的に”イオンペア”と呼ぶことを知りませんでした。いまからやってみます。
酵素の精製を行っています。あれから自分なりに考えて、陰イオン交換なので、カラムの担体から溶離したとき、酵素は通常より多く（？）陰イオンを帯びた状態だから、カチオンを加えろ、ということなのかな・・・と。
ことばの使い方下手ですみません。
でもネットで探してもやっぱりでてこないので、せめて一般的に使われる手法なのかさえわかれば・・・
いや、先生も思いつきで言ったわけではないと思うのですが・・・

補足日時：2011/02/20 11:32

No.2 回答者： kasudako 回答日時： 2011/02/20 13:20

使っている陰イオン交換樹脂は最初何型ですか．（通常はＣｌ型だと思いますが…）　そして，最初は酵素を精製する効果があったのでしょうか

えると）精製する酵素に共存する他の陰イオンがあると，イオン交換樹脂はＣｌ型から，酵素に共存する陰イオンと交換されてしまい，結果として精製能力が低下したのだと思います．　その場合，イオン交換樹脂にＮａＣｌ水溶液（蒸留水に溶解）をゆっくり通液すれば，解決するのではないでしょうか（あるいは精製する酵素の水溶液にＮａＣｌを添加してもよいかもしれません）　ＮａＣｌの濃度は１規定程度でよいと思います．また，イオン交換樹脂のメーカーに確認するのが一番です．きっとていねいに説明してくれるはずです．　参考になりましたか？