セルと吸光度について

400μＬで測定できるブラック側板の容量が0.7mLのセルと、普通の光路長が1cmの透明なセルに同じリン酸緩衝液（カリウム）を入れて吸光度を測定した所、

ブラックセル　0.4231
透明なセル　　0.0435

でした。

この原因はセルのせいなのでしょうか？

それとも測定器のせいでしょか？

No.2 ベストアンサー 回答者： otx 回答日時： 2008/09/26 16:46

同じ測定器を使って同じ波長、しかも同じ溶液を使って行っていらっしゃるようなので、

ここでのパラメーターは「セル」しかないと思いますが・・・。

なので、吸光度の違いは「セル」のせいだと思います。

ちなみに、どのような目的でどのような実験をしようとしていらっしゃるか、わかりませんが、

通常、コントロールとしてバッファーをいれた時の測定値を「０」とし、それに対してサンプルの値はどのくらいになるのか？
という実験をすると思います。

この波長だから、このセルを使うというより、
サンプルによって考えるのではないでしょうか？

コントロールの値とあまり変わらない微妙な値を示すサンプルであるのならば、バックグラウンドが低い透明なセルと使う、とか
サンプルの値はコントロールと桁が違うくらいの値だったら、どっちでもいいとか、
サンプルはプラスチックを溶かすから、石英を使うとか、
サンプルを入れちゃうと汚くなってしまうから、プラスチックのセルを使い捨てにするとか、

難しい理論よりも、まずは実験の目的とか状況を考えたほうがいいと思います。

No.3 回答者： geneticist12 回答日時： 2008/09/26 19:26

>波長は260nmだったんですが、この波長は近紫外線の範囲内なので、この波長を使うときは石英セルを使えば解決すると言う事ですか？

350 nm前後より短い波長では石英のセルを使います。
逆に言うとガラスやプラスチックはそれより長い波長にしか適合しません。
それぞれの材質ごとに、品質が異なるいろいろな製品がありますので、どこまでの波長まで適合するかは、説明書やカタログで確かめてください。

http://www.gls.co.jp/product/catalog-29/16/003.h …
http://www.daico.co.jp/product/prod_23.html
http://www.fujiwara-sc.co.jp/catalog/sel01.html

前の投稿で言及するのを忘れましたが、
ガラスやプラスチックだと紫外線の透過性が低いというほかに、紫外線を吸収して蛍光を発するのも問題です。実際に測定しようとする紫外線がほとんど吸収されてしまい、かわりに発生する蛍光が検出されてしまうようだと、何を計っているのかわからないですね。

No.1 回答者： geneticist12 回答日時： 2008/09/26 00:56

測定に使った波長が問題なんですが、おそらく紫外域の短波長だったのではないですか。

ブラックセルとおっしゃるのは透過面が石英のセル、透明なセルというのは普通のガラスかプラスチックのセルです。
ガラスやプラスチックは紫外線をほとんど通しません、可視光域の測定に使われるものです。紫外域だと、セル自体が紫外線を吸収、散乱してしまい、ものすごく低い値になり、正確な測定もできません。

石英は紫外線も通すので、紫外域の測定に使います。ものすごく高価ですし、変なものの測定に使って汚れがつくと、特に短波長の透過性を妨げるので、ガラスやプラスチックですむ測定には使わないようにします。

この回答へのお礼

波長は260nmだったんですが、この波長は近紫外線の範囲内なので、この波長を使うときは石英セルを使えば解決すると言う事ですか？

お礼日時：2008/09/26 12:09