初歩的な質問です。
等電点電気泳動をこれから、行います。
1次元目が終わり、2次元(SDS-PAGE)を行う際の
ゲルの作り方で質問します。
30%アクリルアミド
Tris-HCL
10%APS
10%SDS
TEMED
H2O
の組成のなかの、30%アクリルアミドの具体的な作り方を
お教えください。
アクリルアミド30g、MilliQで100mlにメスアップ
これをAとする。NN'-メチレンビスアクリルアミドをBとすると
A:B=30:0.8(例えば、15ml:0.4g これを混ぜたものを
30%アクリルアミドとみなす??)
という考えで、良いのでしょうか?
No.1ベストアンサー
- 回答日時:
厳密に言うと、30%アクリルアミドというのは、アクリルアミドとNN'-メチレンビスアクリルアミドを足した濃度なので、それではダメです。
アクリルアミドとNN'-メチレンビスアクリルアミド合わせて30gにして、その後100mlにメスアップします。まあ、そんな細かくやらなくても大して問題ないと思いますが。
しかし、一つ疑問なのはゲルの濃度を30%にしたいのか、30%アクリルアミドでもっと低濃度のゲルを作りたいか、どちらでしょうか?たぶん、後者だと思いますが、前者だった場合作成不可能なのでご注意ください。
回答、有難うございます。
アクリルアミド30g、NN'-メチレンビスアクリルアミド0.8g
・・・でmillQで100mlにすればよいのですね。
これから15%のゲルを作りたいと思っていますので
後者のほうになります。
No.2
- 回答日時:
>アクリルアミド30g、NN'-メチレンビスアクリルアミド0.8g
・・・でmillQで100mlにすればよいのですね。
違います、本当は29.2gと0.8gでなくてはなりません(厳密にやるなら)
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