タンパク質濃度を求めるにあたって、大きく２つ方法があります。

タンパク質濃度を求めるにあたって、大きく２つ方法があります。
一つは紫外吸収法＜以下の式を用いる→＊タンパク質濃度(mg/mL)＝1.45×(280nmにおける吸光度)－0.74×(260nmにおける吸光度)＞
もう一つはBiuret法＜求めた吸光度から検量線を作成し、これからタンパク質濃度を求める＞
この２つの方法のどちらが正確であるか、そしてその理由を教えてください。お願いします。

No.1 ベストアンサー 回答者： gesumon 回答日時： 2010/05/18 16:02

紫外吸収法は、芳香族アミノ酸の吸光度を測定するものですが、置換基ではなくベンゼン環に由来する紫外吸収での測定なので、比較的楽に定量できます。

しかし、そのせいでタンパク質による吸光係数の差が大きくなり、とてもアバウトな定量になりがちです。

それに対してBiuret法は、価銅イオンとペプチド結合とを2錯体形成させるという特異的なものであり、定量が紫外吸収法に比べて正確になります。

ただ、Biuret法は感度が低いので、より正確に定量を行うことができるBCA法やLowry法の方が定量には好ましいです。（時間はかかりますが）